哺乳动物基因组印记的细胞记忆机理初探

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该实验通过对两个印记基因, U2拼接因子小核糖核蛋白附属因子的同源基因(smaIl nuclear ribomicleoprotein auXiliary factor ofU2,U2afl-rsl )启动子区,和类胰岛素生长因子2受体(insulin-like growth factor,2 receptor,Igf2r)基因的差异甲基化区2(differentially methylated region2, DMR2 )进行DNase Ⅰ和HpaⅡ分析发现,作为印记基因重要调控区的启动子区和差异甲基化区,在有丝分裂中期的等位点表现出了对DNase Ⅰ和HpaⅡ不同的敏感性.因而,印记基因调控区在有丝分裂中期有开放的染色质结构,这种结构可以经受中期染色质全基因组范围的凝缩而依然存在.此外,启动子区的甲基化状态在中期也确有差异.对DMR2的分析则表明,等位基因间的DMR2也具有差异空间结构的特点,启动子区和DMR2中开放的染色质结构应该与非甲基化状态相一致.这说明,印记基因的表达模式在染色质上确实有所表征,这种表征(特定的染色质结构)很可能就是印记基因的细胞记忆标记.同时,我们也建立了一种可有效检测甲基化状态的方法--三引物(或四引物)扩增法(套式PCR法),可极大提高检测的可信度,避免假阳性.
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