有氧运动联合迷迭香对肥胖大鼠睾丸组织LC3/TNF-α通路和精子质量的影响

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实验目的:(1)探讨有氧运动和迷迭香对高脂膳食诱导大鼠肥胖形成的干预作用。(2)从睾丸组织LC3/TNF-α通路的变化中,探讨运动训练和补充迷迭香干预,对高脂膳食大鼠自噬介导炎症水平及精子质量的影响研究。实验方法:选取50只SD大鼠随机分为5组:正常对照组(NC组,10只);高脂对照组(HF组,10只);高脂+运动组(HE组,10只);高脂+迷迭香组(HR组,10只);高脂+运动+迷迭香组(HER组,10只)。HR和HER组每天灌胃0.6ml浓度为25mg/kg的迷迭香提取物混合溶液,其他组大鼠每天灌胃0.6ml生理盐水。HE组和HER组每天进行60分钟的无负重游泳,每周6次。10周后,测量大鼠体重、体长,计算Lee’ s指数;采用WHO推荐的Diff-Quik快速染色方法对精子形态进行染色,获得精子活动率;ELISA检测大鼠血清TG、TC、HDL、LDL含量,睾丸组织TNF-α、NF-κB含量;采用RT-PCR检测睾丸组织LC31、LC311、p62、TRAF6mRNA表达水平;通过透射电镜观察睾丸组织超微结构。实验结果:(1)与NC组相比,HF组大鼠体重、Lee’s指数、TG、TC、LDL均显著升高(P<0.05)。双因素方差分析结果显示,有氧运动对高脂膳食大鼠体重、Lee’s指数、TG、TC、LDL的降低均具有显著性作用(P<0.05),HDL无显著性作用(P>0.05);补充迷迭香对高脂膳食大鼠TG、TC、LDL的降低具有显著性作用(P<0.05),体重、Lee’s指数、HDL变化无显著性差异(P>0.05);有氧运动联合迷迭香干预对高脂膳食肥胖大鼠TG、TC的降低具有显著交互作用(P<0.05),但无协同作用,对体长、体重、Lee’s指数、LDL、HDL变化均无交互作用(P>0.05)。(2)与NC组相比较,HF组大鼠精子总数和精子活动率均显著降低(P<0.05)。双因素方差分析结果品示,有氧运动对高脂膳食大鼠精子总数和精子活动率升高具有显著性作用(P<0.05);补充迷迭香对高脂膳食大鼠精子活动率升高具有显著性作用(P<0.05),对精子总数无显著性变化(P>0.05);有氧运动联合迷迭香对高脂膳食大鼠精子总数和精子活动率无交互作用(P>0.05)。(3)与NC组相比较,HF组大鼠睾丸组织NF-κB、TNF-α含量均显著升高(P<0.05)。双因素方差分析结果得知,有氧运动对高脂膳食大鼠睾丸组织NF-κB、TNF-α均显著降低(P<0.05);补充迷迭香使睾丸组织NF-κB、TNF-α均显著降低(P<0.05);有氧运动联合迷迭香对NF-κB、TNF-α降低无显著性交互作用(P>0.05)。(4)与NC组相比较,HF组大鼠睾丸组织LC3-Ⅰ、p62mRNA含量显著升高(P<0.01),LC3-Ⅱ、TAFR6mRNA含量显著降低(P<0.05)。双因素方差分析可知,有氧运动对高脂膳食大鼠睾丸组织中LC3-Ⅰ、p62mRNA水平降低具有极显著作用(P<0.01),LC3-Ⅱ、TAFR6mRNA水平升高具有显著性作用(P<0.05);补充迷迭香对高脂膳食肥胖大鼠睾丸组织中LC3-Ⅰ、p62mRNA水平降低具有显著性作用(P<0.05),LC3-Ⅱ、TAFR6mRNA水平升高具有显著性作用(P<0.05);有氧运动联合迷迭香对肥胖大鼠睾丸组织中LC3-ⅠmRNA水平降低具有显著性交互作用(P=0.015),但无协同作用,对p62、LC3-Ⅱ、TAFR6 mRNA水平均无交互作用(P>0.05)。(5)与NC组相比,肥胖组大鼠线粒体肿胀空泡变性,溶酶体、脂滴增多,线粒体数量减少,线粒体内脊出现不同程度的破坏。有氧运动和补充迷迭香组观察到大量自噬泡和自噬溶酶体的形成。实验结论:(1)本实验成功复制肥胖大鼠模型,肥胖引起大鼠睾丸组织脂代谢系统产生紊乱。单纯有氧运动或迷迭香干预均能抑制大鼠的脂代谢紊乱和抑制肥胖的形成,但二者联合干预不具有协同作用。(2)肥胖引起大鼠睾丸组织的自噬水平降低、炎症水平升高以及精子质量下降。单纯有氧运动或迷迭香干预均能增强大鼠睾丸组织自噬活性,抑制NF-κB信号通路的激活,减少TNF-α转录表达,改善精子质量,但二者联合干预不具有协同作用。
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