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本文直接根据已知的拟南芥DAD1基因序列，设计特异引物，从芸薹属蔬菜(菜心、花椰菜和青花菜)中克隆出DAD1基因的保守片段(DAD1F)，用于创建可调控雄性不育系统。
首先利用RNA反义技术对花药中 DAD1基因表达进行干扰，阻断茉莉酸的合成，从而获得雄性不育转基因植株。由于该不育由茉莉酸合成中断引起，可以通过施用外源茉莉酸来恢复。为研究植物基因工程雄性不育摸索一条新的途径。经过研究，取得以下结果：
1.克隆了芸薹属蔬菜(菜心、花椰菜和青花菜)DAB1基因片段。根据拟南芥DAD1基因的保守序列设计引物，扩增出芸薹属蔬菜：菜心(Brassicarapa ssp chinensis var．utilis Tsen et Lee)、花椰菜(B. oleracea L．var．botrytis)和青花菜(B.oleracea L．var．italica)的DAD1基因片段(DAD1F)，分别命名为 BrcuDAD1F、BobDAD1F和BoiDAD1F。序列同源性比较表明，它们与拟南芥DAD1F基因高度同源，同源性达88％以上。DAD1基因编码一种磷脂酶PLA1，克隆片段DAD1F包括脂肪酶的特征序列G H S L G和催化中心三元组的氨基酸残基。
2.构建了反义OAO1F植物表达载体。分别将菜心、花椰菜和青花菜的DAD1F，反向连入表达载体pBI121，命名为pBI-antiBrcu DAD1F、pBI-antiBobDAD1F和pBI-antiBoiDAD1F，为以后的遗传转化，功能鉴定做准备。
3.反义DAD1F表达载体转化菜心、花椰菜，获得转基因植株。采用农杆菌介导法，带柄子叶做外植体，用菜心反义表达载体(pBI-antiBrcuDAD1F)转化菜心，经过卡那霉素的筛选，得到抗性植物，对其进行Southern杂交表明，检测42份材料，其中有4份DNASouthern检测呈阳性。说明反义BrcuDAD1F已经导入菜心中。
采用农杆菌介导法，下胚轴做外植体，用花椰菜反义表达载体(pBI-antiBobDAD1F)转化花椰菜，经过卡那霉素的筛选，得到抗性植物，对其进行Southern杂交表明，检测37份材料，其中有5份DNA Southern检测呈阳性。说明反义BobDAD1F已经导入花椰菜中。
4.进行了转基因植株的育性鉴定。对转基因菜心进行花粉活力检测。转基因菜心花粉活力低，萌发率低于10％；开花后不能结荚或只结空荚，偶尔可以得到种子，但种子不萌发。用对照非转基因菜心的花粉给转基因菜心授粉，子房可正常膨大形成荚并产生种子。大部分转基因菜心植物学性状与对照(非转基因植株)无明显区别，花器官表现正常。个别转基因菜心花器官畸形。