大鼠胫骨骨折合并颅脑外伤时骨折愈合过程中BMP-7有TGF-β1的表达

来源 :四川医科大学 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:CmMocean
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目的:通过实验研究测定SD大鼠骨折合并脑外伤时骨折愈合不同时间点在血清和局部骨痂中骨形态发生蛋白-7(BMP-7)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平,来初步探讨其骨折加速愈合的作用意义,为临床加速骨折愈合提供新的理论依据。  方法:完全随机的将96只健康SD大鼠(雄性)分为四组:单纯胫骨骨折组(A组)、胫骨骨折合并脑外伤组(B组)、单纯脑外伤组(C组)、正常对照组(D组)。A、B、C组各30只,D组6只。参考文献建立胫骨骨折模型和中度脑外伤模型。分别于术前(0d),术后第3d、1w、2w、3w、4w抽取腹腔静脉血,用ELISA检测法测定血清中BMP-7及TGF-β1的含量。A组和B组分别于造模成功后3d、1w、2w、3w、4w分别处死5只用于进行X线摄片,观察骨折愈合的情况。并在胫骨骨折断端处取骨痂标本,用于HE染色及免疫组化染色,观察骨折愈合过程及局部组织中BMP-7及TGF-β1的变化及表达水平,并将上诉结果进行相关统计学分析。  结果:1、肉眼观察及X线摄片显示:骨折合并脑外伤组较单纯骨折组骨折愈合进程明显加快,骨折处形成骨痂较多,甚至有异位骨化的现象。2、血清中BMP-7及TGF-β1的表达:四个组BMP-7及TGF-β1的含量相互之间在0d均无统计学意义(p>0.05);造模后3d、1w、2w、3w、4w和正常对照组相比,其余三组血清中BMP-7及TGF-β1的含量均有明显提高(P<0.05)。其中BMP-7:A组较B组及C组在3d时含量表达略高,峰值明显提前,各个组相互之间含量表达的差异有统计学意义(P<0.05);1w、2w、3w、4w同一时间段,B组较A组含量明显增高,两组含量之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1的表达:B组较A组3d、1w、2w表达量明显增加,峰值提前(P<0.05);A、B、C组三组相互之间在同一时间点(3d-4w)含量之间的差异均有统计学意义(p<0.05)。3、HE染色示:B组较A组可见大量的成纤维细胞,大量新生血管,成骨活性更强,骨化速度更快,骨折愈合进程明显加快。4、骨折位点骨痂免疫组化染色显示:BMP-7及TGF-β1在整个骨愈合过程中,在炎性细胞,成纤维细胞,软骨细胞及成骨细胞中均有表达,以胞质表达为主,部分细胞核也有表达,B组较A组表达更明显。BMP-7的表达:B组除造模后3d的含量低于A组以外,1w-4w均高于A组,3w及4w时组间对比最明显,3w为A组4.22倍,4w为A组5.67倍;A组和B组在伤后3d、1w、2w、3w、4w骨折位点BMP-7阳性细胞百分数含量之间差异均有统计学意义(p<0.05)。TGF-β1的表达:B组较A组3d、1w、2w含量明显增高且峰值提前,其中1w时最为明显为A组含量的2.56倍,3w、4w低于B组,A组与B组在伤后3d、1w、2w、3w、4w骨折位点TGF-β1阳性细胞百分数含量之间差异均有统计学意义(p<0.05)。  结论:1、大鼠胫骨骨折合并中度脑外伤后相对于单纯胫骨骨折大鼠骨折愈合速度明显加快,表明脑外伤对骨折愈合有促进作用。2、通过实验发现骨折合并脑外伤组较骨折组血清和局部骨痂中BMP-7及TGF-β1的表达明显增高,证实了BMP-7及TGF-β1是骨折合并脑外伤后加速骨折愈合的影响因子;3、脑外伤时骨折愈合加快的过程需要多种细胞因子的参与,BMP-7及TGF-β1可能是其中的一种发挥作用的重要因子之一。
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