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目的研究牙龈癌中磷酸酶-张力蛋白同源基因(PTEN)启动子区甲基化状态及蛋白表达水平,分析其与牙龈癌癌症细胞分化程度、淋巴转移及预后的关系,为牙龈癌的靶向治疗提供理论依据。方法以唐山市协和医院2005年9月至2010年9月收治的牙龈癌患者石蜡标本为研究对象。纳入研究对象的标准为:1经唐山市协和医院病理科诊断为牙龈癌;2患者于唐山市协和医院口腔颌面外科行牙龈癌原发灶切除术,且同期行颈淋巴结清扫术;3随访资料完整。从中随机抽取高、中、低分化各10例(共计30例)。从以上30个病例中抽取牙龈癌旁正常牙龈组织10例做为对照。采用免疫组化法检测正常牙龈与牙龈癌组织中PTEN的蛋白表达差异,甲基化特异性PCR法检测其PTEN基因启动子区甲基化的状态。统计这些病例PTEN启动子区的甲基化状况,结合牙龈癌患者病历资料和随访信息,采用Kaplan-Meier方法绘制生存曲线,分析PTEN甲基化状态与牙龈癌预后的相关性。结果1免疫组化:正常牙龈组PTEN表达为强阳性,阳性率为100%;高分化组PTEN表达阳性率为90%;中分化组PTEN表达阳性率为60%;低分化组仅有2例为阳性的表达,其余均为阴性表达,阳性率为20%,统计结果显示各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。2 MSP:牙龈癌组织中PTEN基因甲基化的概率为56.67%,其中高分化组甲基化率为20%,中分化组为50%,低分化组为100%,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。17例PTEN基因甲基化的牙龈癌组织中有4例PTEN蛋白阳性表达,13例PTEN基因非甲基化的牙龈癌组织中有13例PTEN蛋白阳性表达,PTEN基因启动子甲基化与PTEN蛋白表达有关(r=-0.765,P<0.05)。3结合临床病历资料发现:淋巴结转移患者出现PTEN基因甲基化12例,甲基化率为85.7%,无淋巴结转移者出现PTEN基因启动子甲基化5例,甲基化率为31.3%,淋巴结转移者PTEN甲基化率显著高于无淋巴结转移者,差异具有统计学意义(P<0.05)。PTEN基因启动子甲基化患者的中位无瘤生存时间(DFS)与总生存时间(OS)分别为48和56个月,无甲基化患者的DFS和OS分别为83和100个月,两者间比较差异具有统计学差异(P<0.05)。单因素分析显示PTEN甲基化、细胞分化程度、淋巴转移与牙龈癌患者DFS和OS相关(P<0.05)。COX预后多因素回归分析结果显示PTEN甲基化、细胞分化程度与牙龈癌患者DFS相关(P<0.05);淋巴转移与牙龈癌患者OS相关(P<0.05),而PTEN甲基化与牙龈癌患者OS无明显相关(P=0.053)。结论1 PTEN蛋白在牙龈癌中的表达水平比正常牙龈中的表达均低。PTEN蛋白在低分化牙龈癌中的表达水平低于高分化牙龈癌中的表达水平。正常牙龈中PTEN无甲基化,而牙龈癌中PTEN甲基化现象显著。且低分化牙龈癌组中甲基化率高于高分化牙龈癌组。牙龈癌中PTEN基因甲基化与PTEN蛋白表达呈负相关。2PTEN甲基化与牙龈癌患者细胞分化程度、淋巴结转移相关,且淋巴结转移组PTEN甲基化率高于无淋巴结转移组。单因素分析PTEN甲基化、淋巴转移、细胞分化程度是影响牙龈癌患者复发和生存时间的危险因素。多因素分析PTEN甲基化、细胞分化程度是影响牙龈癌患者复发的危险因素;淋巴转移是影响牙龈癌患者OS的独立危险因素,而PTEN甲基化不是影响牙龈癌患者OS的危险因素。