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胚胎干细胞(ES细胞)是从动物附植前胚胎的内细胞团(ICM)或原始生殖细胞(PGCs)分离出来，经体外抑制分化培养筛选得到的具有多能性的胚胎细胞。由于胚胎干细胞独特的生物学特性，在体外研究胚胎的发生发育、药物筛选，以及作为组织移植、细胞治疗和基因治疗的细胞源、克隆动物、转基因动物生产、组织器官的修复和移植等方面有着诱人的前景，因而成为当前研究的热点。本研究探讨不同分离方法和不同饲养层对鸡ES细胞的影响，对体外培养的鸡ES细胞的生物学特性进行了研究并进行了传代培养，同时挑取生长状态良好未出现分化迹象的细胞克隆进行自然分化潜能的研究。
本研究比较了普通法和药勺法提取胚盘的效果，结果表明，药勺法相对普通法而言，其在分离胚盘时操作简单、方便、节省时间，容易得到完整的胚盘，分离率在70％以上。
本研究用传至第2代的鸡胚成纤维细胞(CEF)以及传至第2代的鸭胚成纤维细胞(DEF)作饲养层，比较这两种饲养层以及不用饲养层(no feeder)对鸡ES细胞体外培养的影响。结果显示，以鸡、鸭成纤维细胞作饲养层培养鸡ES细胞均可传至第5代，鸡ES细胞在这两种饲养层上均能维持干细胞的多能性，因此CEF与DEF均可用作分离培养鸡ES细胞的饲养层。
本研究比较了挑克隆法和全消化法对鸡ES细胞传代的影响，结果表明挑克隆法加胰酶消化的传代效果最好。
本研究采用二甲亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)和甘油作冷冻保护剂，对X期鸡胚中分离获得的鸡ES细胞进行了冷冻保存研究，并比较这三种冷冻保护剂单独使用时对鸡ES细胞的保护效果，复苏后用台盼兰染色计算细胞存活率以及观察细胞在ES细胞培养体系中的生长状态。结果显示，①当DMSO的浓度为5％、10％以及15％时，鸡ES细胞复苏后的存活率分别为73.57％、85.47％和78.9％；当EG浓度为5％、10％和15％时，细胞的复苏率分别为68％、74.3％和67.7％，三者之间差异不显著(P＞0.05)；当甘油浓度为5％、10％和15％时细胞的复苏率分别为31.2％，51.4％和50.6％，三者差异不显著(P＞0.05)。在相同浓度下，以DMSO保护效果最佳，EG次之，甘油最差。同一种保护剂，在5％、10％和15％的浓度下，以10％浓度的保护效果最佳。②以DMSO为冷冻保护剂，复苏后的鸡ES原代培养在饲养层上可以较好的生长，并形成集落，当浓度为10％时碱性磷酸酶(AKP)阳性克隆数最高为23.5个。结果提示，以10％的DMSO作为鸡ES细胞冷冻保护剂最佳。
通过对体外培养的ES细胞进行AKP染色以及免疫组化的方法检测SSEA-1来鉴定ES细胞的生物学特性。结果显示，传至第4代的鸡ES细胞经AKP染色后呈深蓝色，而饲养层不着色；免疫组化染色，在荧光显微镜下观察，可见SSEA-1在鸡ES表面呈绿色荧光。而作为对照的，未加一抗的细胞和饲养层细胞均呈阴性。表明在这种培养体系中，培养至第4代的鸡ES细胞仍保持干细胞未分化特性；鸡ES细胞在体外无抑制分化因子及无饲养层的条件下，经悬滴-悬浮培养法可自发分化为拟胚胎，最外层分化为较大细胞组成的内胚层样结构，中心为未分化细胞，类似早期胚胎的结构。用RT-PCR检测的方法，发现三个胚层的特异性基因CH-T、TTR和activin-β均有表达。说明ES细胞具有分化的多潜能性。