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塞内卡病毒A（Senecavirus A,SVA）,又称为塞内卡谷病毒（Seneca Valley Virus,SVV）。中文翻译名称又有塞内卡谷病毒、塞尼卡病毒和塞内加病毒,是造成猪水疱病影响我国养猪业一种新型重要病毒。SVA感染可引起仔猪突发死亡和育肥猪嗜睡、厌食、口鼻部和蹄部出现囊泡、溃疡、结痂等症状,给养殖业出口带来一定影响。自2015年中国广东首次报道猪场感染SVA以来,我国湖北、黑龙江、福建等多省份猪场水疱病病例报道日益增加,逐渐引起国内学者的关注。本研究通过对不同日龄猪临床感染塞内卡病毒A,观察了感染病毒后的临床症状,研究了中和抗体、病毒血症、结构蛋白抗体随感染时间的变化规律,同时对间接ELISA抗体检测方法进行了优化,进行了不同省份2016-2019年血清学调查。本研究的具体内容如下:1.塞内卡病毒A分离毒株SVV-CH-SD对猪的致病性研究为了明确SVA山东省分离毒株SVV-CH-SD的致病特性,本研究选取40头30-35、55-65和90-100日龄三个日龄段的SVA阴性健康猪,将20头30-35日龄和55-65日龄猪分别随机分为2组,每组5头,即30-35日龄感染组、30-35日龄对照组;55-65日龄感染组、55-65日龄对照组。将20头90-100日龄SVA阴性健康猪随机分为4组,每组5头,即90-100日龄滴鼻攻毒组、90-100日龄口鼻攻毒组、90-100日龄蹄部肌注组和90-100日龄对照组。攻毒剂量为10ml SVV-CH-SD/头（109TCID50/mL）,攻毒后隔离饲养28d,每日记录临床症状。攻毒后第0、3、7、14、21和28d采血测定病毒血症、中和抗体和ELISA抗体。攻毒后第28天处死所有猪只,观察肉眼病理变化并收集感染组心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、口腔液和腹股沟淋巴结,确定各脏器病毒载量。结果为:3个日龄段猪攻毒后仅有各别猪出现体温升高,90-100日龄猪三个攻毒组中7头猪出现水疱病特征病变,但所有试验猪未出现死亡,且脏器无特异性病变,实时荧光定量PCR检测,攻毒猪心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、口腔液和淋巴结中均检测到SVA;血清中病毒血症在攻毒后第3天达到顶峰,随后快速下降、直至第28天完全消退;血清中和抗体在攻毒后第14天达到峰值,并持续至试验结束,各攻毒组之间无显著差异。SVAVP1、VP2、VP3、VP4蛋白ELISA抗体在攻毒后第14天达到峰值,并持续至试验结束。本试验成功构建了 SVA人工感染猪体发病模型,证明SVV-CH-SD分离株可以感染30-100日龄猪,对90-100日龄猪有临床致病作用,病毒感染后可产生明显病毒血症,多个组织器官带毒。随着病毒抗体的产生,病毒血症水平逐渐降低,为该病毒致病机制研究和疫病防控奠定了基础。2.塞内卡病毒A VP2蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用本研究采用RT-PCR方法,从SVV-CH-SD毒株扩增获得VP2基因片段,克隆至pET-32a（+）表达质粒,基因测序分析鉴定正确。将其转化至感受态细胞BL21（DE3）上,并进行诱导表达。结果证明,重组菌株可以表达抗原性良好的分子量大小为55 kDa的融合蛋白。以纯化的VP2蛋白作为包被抗原,经过系列条件优化,建立了 SVAVP2间接ELISA抗体检测方法。本方法特异性好,与五种常见猪流行病病毒阳性血清均无反应。本方法敏感性为91.6%,符合率为91.9%,批间重复试验、批内重复试验结果均在14%以内,显示本方法重复性好。将该方法用于检测2016年～2019年福建、江苏、安徽、浙江、山东、河南、辽宁、江西、山西、天津、河北和湖南等12个省份2828份猪血清,抗体阳性率72.7%,华东、华北和华中地区抗体阳性率分别为70.8%、90.6%、74.6%,2016年抗体阳性率最高为87.1%。该方法特异性、敏感性和重复性较好,可用于SVA抗体检测和流行病学调查研究。