论文部分内容阅读
干旱、高盐、低温等非生物逆境严重影响植物的生长发育和农作物的产量。植物对非生物逆境的响应，受一个由多条途径组成复杂网络调控，深入剖析该调控网络，对应用基因工程技术来提高农作物的抗逆性具有重要意义。玉米作为重要的粮食作物，抗旱性较差，在水资源严重短缺的今天，借助分子育种学方法提高玉米的抗旱性，对于保障我国粮食生产安全具有重要的现实意义。 本实验室通过前期的工作分离得到了玉米逆境诱导基因ABP9和ZmCBF3，并通过后续的研究证明这两个基因具有全面提高植物对各种非生物逆境耐受性的功能。为了进一步研究这两个基因在玉米抗逆生理活动中发挥的作用以及他们之间的联系，需要获得一系列转ABP9和ZmCBF3基因的玉米植株。 本论文的研究工作主要包括以下几方面: 1、克隆了玉米rab17基因的启动子，用于构建包含APB9基因和ZmCBF3基因的载体，加上本实验室之前已有的部分载体，形成了一系列包含这两个基因的组成型、诱导型、单基因、双基因表达载体，并将这些载体转化农杆菌得到了玉米转基因所需的工程菌。 2、通过基因枪法、农杆菌介导转化幼穗法、农杆菌介导转化幼胚法，三种方法转化玉米，转化使用的玉米野生型为齐-319。 3、对转基因玉米T1代植株进行筛选和分子鉴定，顺序使用了田间草铵膦喷洒——PCR扩增——Southern Blot——Western Blot——Northern Blot的方法，最终获得了一株转pCAMBIA3301-Pabp9-ZMCBF3-ADH1-Pabp9-ABP9-Tnos载体的玉米植株。但整体转化效率较低。 上述工作为玉米转基因植株的获得和分子鉴定提供了参考，所获得的转基因玉米为ABP9基因和ZmCBF3基因功能的研究提供的材料。