酿酒酵母的筛选鉴定及耐受性初步研究

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酿酒酵母是葡萄酒工业发酵最主要的酵母菌。优质葡萄酒的生产迫切需要具有产区特征、能体现葡萄酒特色和风格的优良酵母菌种。对我国本土酵母菌资源的研究是酵母菌种选种、育种的基础。宁夏、甘肃葡萄产区是优质葡萄酒生产区。本研究从分离自宁夏、甘肃地区的葡萄酿酒相关酵母菌中进行酿酒酵母菌的筛选、鉴定,同时,进行了酿酒酵母的耐受性初步研究。1酿酒酵母的筛选与鉴定对分离自葡萄果实表面、酒厂设备、葡萄园土壤、葡萄自然发酵醪的酵母菌种经过WL培养基、赖氨酸培养基、菌落的形态特征及生殖方式的检测,初步确定58株酿酒酵母。经过糖发酵、碳源同化、氮源同化试验,与菌种鉴定手册对照,确认筛选的菌株为酿酒酵母。挑选部分菌株进行26SrDNA基因序列测序分析,使用Blast在线软件进行相似性分析,测序结果查询GenBank数据库,得到结果证实筛选出的酵母是酿酒酵母。实验对WL培养基、赖氨酸培养基、无性繁殖方式筛选三种方法进行比较,结果显示:对酿酒酵母筛选准确度高、简单易行的方法是无性生殖方式与WL培养基结合使用,尤其对大量菌种的筛选,能够节约时间,减少工作量,提高效率。2对供试进行耐受性分析供试酿酒酵母普遍能够耐受10%(v/v)酒精,少数不能耐受12%(v/v)酒精,耐受能力较强的最多能耐受14%(v/v)酒精,高于此浓度菌株不能存活。供试野生酿酒酵母普遍能耐受1.8mol/L KCl浓度,有个别菌株能耐受2.2 mol/L浓度,仅有C242能耐受2.4 mol/L浓度。供试野生酿酒酵母只有菌株N5254、C190在37℃不能够生长,其它都能耐受37℃;而只有C242、C720能够耐受42℃,其他菌株在42℃都不能生长。野生酿酒酵母饥饿耐受力测试结果表明,所有菌株均能够耐受10d饥饿后而生长良好。野生酿酒酵母菌能够耐受50%以下的葡萄糖浓度,但是均不能耐受60%葡萄糖浓度。野生酿酒酵母对pH的耐受范围相当广泛,在pH为1.5时不生长,在pH为2.0时,生成红褐色的沉淀。其他酸度均能够生长良好,尤其在pH为4时。
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