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癌症一直是人类难以攻克的医学难题之一,也是医学研究的热点之一。因为乳腺癌细胞的耐药性,使得乳腺癌难以治愈。目前通过siRNA和药物进行联合治疗成为癌症的治疗手段之一。但是由于siRNA的负电性和大多数药物的疏水性,同一种载体难以实现同时负载siRNA和药物,这也是目前联合治疗所面临的一大难题。本论文主要通过对前期工作制备得到的有序介孔聚合物纳米球(MPNs)依次进行聚乙烯亚胺(PEI)、葫芦脲[7]和靶向分子叶酸(FA)接枝后实现对有序介孔聚合物纳米球的改性及功能化。改性和功能化后的有序介孔聚合物纳米球可以同时负载治疗剂c-Myc siRNA和紫杉醇并主动靶向进入癌细胞,从而达到联合治疗的目的。本论文通过MPNs通过接枝PEI得到了改性的MPNs(MPNs-PEI),呈正电性的MPNs-PEI可以更为有效地吸附呈负电性的c-Myc siRNA,使c-Myc siRNA能更多地进入到介孔聚合物纳米球孔内;MPNs-PEI通过接枝葫芦脲[7]和靶向分子叶酸(FA)得到了MPNs-PCF,接枝葫芦脲[7]后使得疏水性药物紫杉醇能够有效进入葫芦脲[7]腔内,实现了MPNs-PCF对c-Myc siRNA和紫杉醇的双载,即得到MPNs-PCF@siRNA/PTX;接枝叶酸后使得MPNs-PCF具备靶向功能,使其能够主动靶向进入癌细胞内。考察了MPNs-PCF在有无酶作用及不同pH值PBS缓冲液中的降解能力、负载siRNA和紫杉醇的能力。考察了MPNs-PCF@siRNA/PTX在不同pH值PBS缓冲液中的释放能力。在细胞学层面,通过荧光染色和MTT法定性定量地考察了MPNs-PCF@siRNA/PTX的生物相容性;通过MTT法考察了MPNs-PCF@PTX的细胞毒性;通过荧光染色和流式细胞术考察了MPNs-PCF@siRNA/PTX的内吞和凋亡效果;通过RT-PCR和WB考察了MPNs-PCF@siRNA/PTX对于MCF-7乳腺癌细胞基因mRNA和蛋白表达的抑制情况。在动物学层面,构建MCF-7肿瘤模型,通过抑瘤实验和组织病理学检测法考察了MPNs-PCF@siRNA/PTX的治疗效果。实验结果显示,制备得到的MPNs-PEI具有大小均一、球形形状完整、分散性良好等优点。MPNs-PCF良好的生物可降解性证明其应用于体内时,不会因为积聚在体内而对生物体产生负面影响。负载释放实验结果显示,MPNs-PCF具有高的包覆率和负载率,其对siRNA和紫杉醇的包覆率高达94.38%和92.07%,当MPNs-PCF和紫杉醇、siRNA以1:1负载时,紫杉醇负载率达到49.51%,siRNA负载率达到44.51%,并且缓释效果良好。细胞实验结果显示,MPNs-PCF@siRNA/PTX具有良好的生物相容性,且MPNs-PCF能够显著降低药物的IC50值;细胞内吞实验结果显示,MPNs-PCF@siRNA/PTX内吞效果最为明显;细胞凋亡实验结果显示,MPNs-PC@siRNA/PTX和MPNs-PCF@siRNA/PTX的细胞凋亡率分别为63.5%和83.5%;RT-PCR和WB结果显示,MPNs-PCF@siRNA/PTX的基因抑制率高达82%,蛋白表达抑制率为61%,远远高于对照组,显示出良好的抑制效果。动物实验结果显示,MPNs-PCF@siRNA/PTX实验组的肿瘤抑制率高达76.3%,MPNs-PCF@siRNA/PTX实验组与对照组相比,其裸鼠生存周期延长,体重呈上升的趋势,肿瘤生长速率缓慢。组织病理学结果显示,MPNs-PCF@siRNA/PTX实验组裸鼠脏器损伤程度最小,肿瘤治疗效果良好。综上所述,我们构建的治疗体系(MPNs-PCF@siRNA/PTX)在治疗肿瘤方面体现了优越的治疗效果。