纳米粒子与蛋白相互作用及环糊精与氨基酸包合作用的研究

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一.血红蛋白与金纳米粒子相互作用的研究 在磷酸盐缓冲体系中运用紫外一可见吸收光谱(UV-Vis)、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色光谱(CD)及傅立叶变换红外光谱(FTIR)等手段,研究了血红蛋白与金纳米粒子的相互作用。实验表明结果表明,血红蛋白能吸附在金纳米粒子的表面,使其520nm附近的特征等离子体共振吸收峰强度下降,峰位红移.随金纳米粒子的浓度增大,血红蛋白分子中Soret带的吸收持续降低,说明金纳米粒子可能使部分血红素辅基从它们的键腔中脱离出来.Stem-Volmer方程分析表明,金纳米粒子静态猝灭血红蛋白的内源荧光.由UV-Vis和荧光光谱的变化,计算血红蛋白与金纳米粒子的结合常数.同步荧光光谱的红移说明,金纳米粒子扰动血红蛋白分子内部的酪氨酸、色氨酸残基所处的微环境,使之包埋于疏水腔中.拟合计算远紫外CD数据发现,金纳米粒子诱导血红蛋白产生轻微的二级结构改变,α-螺旋含量降低.FTIR光谱结果提示,血红蛋白中半胱氨酸残基的硫、羧基氧、酰胺及氨基酸残基中的氮原子与金纳米粒子可能有表面键合作用. 二.血清蛋白与金纳米粒子相互作用的研究用紫外一可见光谱和荧光光谱研究了金纳米粒子与牛血清白蛋白(bovine serumalbumin,BSA)的相互作用。荧光研究表明,金纳米粒子的增加引起BSA 345 nm处荧光有规律地猝灭。Stern-Volmer方程分析荧光猝灭机理发现,pH6.0体系为静态猝灭。圆二色光谱研究表明,pH 6.0条件下金纳米粒子浓度的增加引起BSA二级结构发生变化,即螺旋结构变松散:同步荧光光谱(△λ=15 nm和△λ=60 nm)分析金纳米粒子对BSA芳香性氨基酸(Trp,Tyr)残基微环境的变化,结果表明金纳米粒子使所有这些芳香性氨基酸残基微环境由疏水环境转变为亲水环境。 三.羟丙基-β-环糊精与L-色氨酸包和作用的研究通过光谱法和热力学方法研究了羟丙基-β-环糊精与L-色氨酸的包和作用。随羟丙基-β-环糊精的浓度增大,L-色氨酸的紫外强度、荧光强度增强,证明两者非共价包结作用的存在,并通过Benesi-Hildebrand方法计算该条件下的K<,D>=1.3×10<-4>mol·L。计算了pH 6.8条件下羟丙基-β-环糊精与L-色氨酸在本实验条件下相互作用的热力学常数如:吉布斯自由能变(-31.78KJ·mol<-1>)、熵变(526.84J·mol<-1>·K<-1>)、焓变(-201.95 kJ·mol<-1>)等.
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