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目的:研究我院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌及大肠杆菌耐药趋势,应用GeneXpert法检测携带耐药基因情况,为我院指导临床合理用药提供实验依据。为我院预防和控制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌及大肠杆菌的感染和暴发流行提供参考。方法:收集中国医科大学附属盛京医院2013年1月-2017年6月从临床标本培养出的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌60株,2015年1月-2018年1月耐碳青霉烯类大肠杆菌60株。剔除同一患者重复菌株。应用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定,对初筛的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌及大肠杆菌进行K-B纸片扩散法药敏确证实验。应用GeneXpert方法对5种耐药基因(KPC、NDM、IMP-1、OXA-48、VIM)进行检测。结果:我院分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌对阿米卡星敏感性最高,达78.95%。左氧氟沙星及环丙沙星敏感率分别为48.28%和43.10%。对庆大霉素和妥布霉素、复方新诺明敏感率分别37.93%、35.71%及29.31%。呋喃妥因敏感率为5.26%,中介率为28.95%。氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、头孢吡肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢唑林、氨苄西林/舒巴坦敏感率0%-15.52%。应用GeneXpert方法检测5种耐药基因,结果示携带碳青霉烯酶49株,占81.67%;未携带碳青霉烯酶11株,占18.33%。其中,携带单一KPC酶19株,占31.7%;携带单一NDM酶18株,占30%;携带单一IMP-1酶1株,占1.7%;同时携带KPC和NDM酶9株,占15%;同时携带KPC和IMP-1酶1株,占1.7%;同时携带IMP-1、KPC和NDM酶1株,占1.7%;其余型耐药基因未检出。亚胺培南药物敏感性MIC值与是否检出耐药基因差异存在统计学意义,检出耐药基因菌株对亚胺培南耐药更严重。检出耐药基因数量与患者预后差异无统计学意义。我院60株耐碳青霉烯类大肠杆菌的药敏结果对替加环素敏感率为100%。对阿莫西林/克拉维酸和阿米卡星敏感率分别为95%和90%。对氨曲南敏感率为48.08%。氯霉素及庆大霉素敏感率分别为35.14%和26.67%。其它常见抗菌药物包括哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星、复方新诺明、左氧氟沙星、四环素、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、头孢曲松、头孢唑林、头孢唑肟、氨苄西林敏感率在0%-13.33%。耐药基因检测结果示携带碳青霉烯酶56株,占93.33%;未携带碳青霉烯酶4株,占6.67%。其中产酶耐药菌株全部为携带单一NDM酶,其余型耐药基因未检出。结论:我院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌及大肠杆菌呈多重耐药,情况不容乐观。阿米卡星、替加环素、阿莫西林/克拉维酸可选择作为治疗药物。菌株产酶率高,提示耐药基因正在迅速蔓延,应引起临床及科研重视。GeneXpert方法作为快速基因水平检测感染性病原体新方法值得关注。