【摘 要】
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乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界性难题,不仅会造成急、慢性肝炎,而且与肝硬化和肝癌的发生密切相关。全世界约有3.5亿HBV慢性感染者,每年有50-120万人死于HBV感染引起的疾病,其
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乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界性难题,不仅会造成急、慢性肝炎,而且与肝硬化和肝癌的发生密切相关。全世界约有3.5亿HBV慢性感染者,每年有50-120万人死于HBV感染引起的疾病,其中死于肝癌的约为32万。我国是HBV感染的高发区,约60％的人群感染过HBV,10％的人群为HBsAg携带者,多达1.2亿,现有乙型肝炎患者约为1200万,乙肝给国家和人民造成了极大的危害。
目前用于抗HBV治疗的抗病毒药物主要有a.干扰素和以拉米夫定为代表的核苷类似物,但由于药物长期疗效差、反跳率高、副作用等各种问题限制了临床应用。中药在抗HBV的辅助治疗、恢复肝功能、调整免疫功能以及抗肝纤维化方面都取得进展,占有一定优势,但是在解决乙肝的根本问题,即抗病毒治疗方面尚无重大进展。单一药物治疗乙肝根本不能达到患者的理想状态,参考治疗艾滋病的经验,人们推测合理的联合药物治疗可以提高药物疗效,由于拉米夫定的诸多优点,大多数联合治疗试验均将其纳入,加之中医药在治疗中恢复肝功能、防止肝纤维化、调整免疫机能等方面都有一定的优势,拉米夫定联合中药治疗慢性乙型肝炎的思路已经成为新的研究方向。
HepG2.2.15细胞是体外研究HBV复制较为理想的细胞感染模型。HepG2.2.15细胞是来源于HepG2细胞,整合了ayw型HBV全基因组,能够部分模拟HBV的生活周期,表达各种HBV产物并能分泌HBV Dane颗粒的稳定的人类肝癌细胞株,更接近于人体肝细胞内环境的实际情况,被研究者广泛应用于HBV复制的研究.因此本实验拟应用HepG2.2.15细胞模型体外研究拉米夫定分别与原儿茶酸(PA)、齐墩果酸(OA)、鞣花酸(EA)等中药有效成份配伍使用,采用酶联免疫吸附法(ELISA)及荧光定量PCR,通过检测药物组合对细胞培养上清中HBsAg、HBeAg浓度和HBV DNA的抑制作用,各组结果用平均值±标准差表示,组间比较用单因素方差分析,两组间比较用t检验。
结果表明在3TC+PA联合应用可明显增强对HBV的抑制作用,PA:3TC=100时,联合用药组对HBeAg和HBsAg的抑制与单甩3TC组相比,有极显著性差异,联合用药组对HBV DNA的抑制与单用3TC组相比,有显著性差异,联合用药达到最佳效果。本实验证明3TC+PA在体外对HBV的抑制有明显的协同作用,为进一步动物实验乃至应用于临床提供了较好的理论基础和实验依据。
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