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本研究围绕肝炎，一方面建立了一个新的肝损伤动物模型，初步探讨了其病理特点和相关机理；另一方面还探讨了fumigaclavineC对ConA所致肝损伤的改善作用与机理。本研究第一章主要研究了LacBSA致小鼠免疫性肝损伤动物模型的病理特点和相关机理。肝脏靶向性的传输药物可通过肝细胞表面的寡唾液酸糖蛋白受体来实现。而乳糖化的牛血清白蛋白可通过该受体被肝细胞摄取。在第一节中，我们以氰硼氢化钠为还原剂将乳糖(lactose)结合到牛血清白蛋白(BSA)上得到了具有肝靶向性的抗原——乳糖化的牛血清白蛋白(LacBSA)，并确定了不同反应时间产物中乳糖和牛血清白蛋白的比例，随后又在LacBSA上标记了异硫氰酸荧光素(FITC)，以此在小鼠体内和体外HepG2肝癌细胞株上验证了LacBSA的肝细胞的靶向性。结果发现，与BSA相比，LacBSA在血清中的清除变化缓慢；在五大脏器(心、肝、脾、肺、肾)中，更加集中分布于肝脏。LacBSA还可通过HepG2细胞表面的寡唾液酸糖蛋白受体被肝细胞摄取。因此，我们认为LacBSA是合适的具有肝靶向性的潜在抗原。
在第一章的第二节中，我们首先优化了模型建立的致敏条件和攻击条件。结果发现，额外在每毫升完全弗氏佐剂(CFA)中加入0.6mg的结合杆菌可使抗原的反应性显著增强，而抗原蛋白中乳糖和牛血清白蛋白比例的增高对其反应性有一定的削弱；在最适致敏条件下，尾静脉最佳的攻击剂量为0.2mg/kg；在攻击后18h，模型小鼠血清中的转氨酶(ALT，AST)、组织中的丙二醛(MDA)和碱性磷酸酶(AKP)都显著的升高，而血清中的AKP和组织中的超氧化物歧化酶(SOD)均显著的降低，其他的指标则无显著变化。在其后的慢性化过程中，模型小鼠血清和组织中的各指标都存在不同程度的变化，尤其是血清中的AKP和组织中的MDA、SOD和乳酸脱氢酶(LDH)等。急、慢性相的病理组织学研究也表明，急性相肝损伤中存在着肝细胞的坏死和脂肪变性以及炎细胞浸润，而在慢性相中，这些指标不但更加严重，部分小鼠还出现了结缔组织增生。此外，LacBSA所致小鼠肝损伤的病理组织学研究表明，淋巴细胞的浸润是该肝损伤的重要特征，因此本节随后又进一步的探讨了外周淋巴细胞在该模型中的作用及其作用方式。结果发现，攻击前给小鼠进行脾切除手术可显著的降低模型小鼠攻击后18h血清中ALT的水平。应用胶原酶灌流及差速离心分离小鼠的肝细胞(HC)和非实质细胞(NPC)，然后将脾细胞(SPC)或NPC分别与HC共培养或应用Transwell系统进行隔离培养来观察淋巴细胞对肝细胞的杀伤作用，发现6h的SPC和12h的NPC共培养对HC的杀伤显著强于隔离培养，表明SPC/NPC可通过液性因子杀伤HC，而两种细胞的直接接触更可增强其对HC的杀伤作用。
本文的第二章探讨了fumigaclvinec对免疫性肝损伤的改善作用及其机理。FumigaclavineC是从狗牙根(Cynodondactylon)曲霉属(Aspergillussp.)内生真菌(菌株编码：CY018)的固体发酵产物中分离得到的一种麦角灵类生物碱。我们首先观察了该化合物对T淋巴细胞介导的ConA所致小鼠肝损伤的改善作用。ConA注射后所引发的急性肝损伤会伴有T淋巴细胞的活化、脾细胞粘附能力的增强和TNF-α的大量产生。腹腔注射fumigaclavineC可剂量依赖性的抑制模型小鼠血清中转氨酶的上升和TNF-α的产生，也可显著的改善包括肝细胞的变性和坏死、炎性浸润和枯否氏细胞的增生等方面的病理组织学改变。进一步的研究表明，该化合物在体外显著的抑制了ConA诱导的脾细胞的增殖及其IL-2和TNF-α的释放，腹腔注射给药还可抑制模型小鼠2h的脾细胞与fibronectin、laminin和collagenⅣ间的粘附。此外，该化合物体外不仅可抑制ConA活化的Jurkat细胞与细胞外基质和内皮细胞间的粘附，还可抑制PMA刺激的内皮细胞ECV-304与Jurkat细胞间的粘附。以上结果表明，fumigaclavineC可显著改善ConA所致的小鼠肝损伤，其机制可能包括抑制T淋巴细胞的活化和增殖、下调淋巴细胞与细胞外基质和内皮细胞之间的粘附能力以及减少TNF-α的产生。
综上所述，本论文得到以下结论：1)LacBSA是合适的具有肝细胞靶向性的抗原。在LacBSA致小鼠肝损伤模型中，一次攻击其肝损伤可维持数月而且还有不断恶化的趋势，而外周淋巴细胞在该肝损伤的病理过程中发挥着重要的作用。淋巴细胞可通过液性因子杀伤肝细胞，其在共培养体系中的杀伤作用强于Transwell隔离培养系统。2)FumigaclavineC可剂量依赖性的改善ConA所致的小鼠肝损伤，其作用机理可能包括抑制淋巴细胞的活化与增殖、下调淋巴细胞与细胞外基质问的粘附以及减少TNF-α的产生。