二甲双胍对卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP凋亡与自噬的影响

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目的探讨二甲双胍对卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP凋亡及自噬的影响。方法MTT法检测SKOV3/DDP细胞耐药性;不同浓度二甲双胍作用于SKOV3细胞及SKOV3/DDP细胞,以SKOV3作为对照,MTT法测定细胞的增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡;电镜下观察细胞自噬体的形成;Western blot检测二甲双胍作用前后细胞自噬相关蛋白LC3的表达水平。应用SPSS17.0软件进行统计学处理。结果1 MTT法检测发现:SKOV3细胞的IC50为14.35μg/m L,SKOV3/DDP细胞的IC50为70.26μg/m L,SKOV3/DDP耐药指数为4.89。2 MTT法检测发现:2.5、5、10mmol/L二甲双胍作用SKOV3及SKOV3/DDP细胞24h、48h和72h后,两组细胞的增殖均受到抑制,呈时间和浓度依赖性(P<0.05)。当二甲双胍浓度为10mmol/L时,对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用强于SKOV3细胞(P<0.05)。3流式细胞仪检测细胞凋亡发现:2.5、5、10mmol/L二甲双胍作用SKOV3及SKOV3/DDP细胞48h后,各组细胞的凋亡率均增加,并且呈浓度依赖性(P<0.05)。当二甲双胍浓度为10mmol/L时,对SKOV3/DDP细胞的促凋亡作用强于SKOV3细胞,差异有统计学差异(P<0.05)。4电镜下观察发现:二甲双胍作用前,SKOV3与SKOV3/DDP细胞内未见明显自噬体,10mmol/L二甲双胍作用两种细胞48h后,SKOV3细胞内未观察到自噬体,SKOV3/DDP细胞内观察到自噬体增多。5 Western blot检测发现:当二甲双胍作用48h后,两种细胞中LC3-II蛋白的表达水平均增高(P<0.05),并且SKOV3/DDP细胞中LC3-II蛋白的表达水平高于SKOV3细胞(P<0.05)。二甲双胍作用前,SKOV3/DDP细胞中LC3-II蛋白的表达水平高于SKOV3细胞(P<0.05)。结论1二甲双胍抑制SKOV3/DDP细胞的增殖并诱导其凋亡。2二甲双胍可以促进SKOV3/DDP细胞的自噬。3 SKOV3/DDP细胞的自噬活性高于SKOV3细胞。410mmol/L二甲双胍对SKOV3/DDP细胞的抑制增殖、诱导凋亡及促进自噬作用强于SKOV3细胞。
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