高温对大黄鱼生理生化影响及相关微卫星标记筛选

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本论文以大黄鱼为实验材料,研究了持续7 d和14 d 32℃高温对12月龄大黄鱼血清生化指标影响;通过缓慢升温,观察了高水温对2月龄大黄鱼摄食及行为的影响,并采用分群分析法(BSA)对耐热和不耐热大黄鱼个体进行了微卫星分析,筛选出与大黄鱼高温相关的微卫星标记。主要结果如下:1、对12月龄大黄鱼高温处理7 d后,碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶同工酶、谷酰转肽酶、乳酸脱氢酶的活性均有所升高,除碱性磷酸酶,其余五种酶与对照组(25℃)差异均达到极显著水平(P<0.01);血清中Cl-、Na+和Ca2+的浓度与对照组差异不显著(P>0.05),而K+的浓度显著低于对照组(P<0.05);血清中总蛋白、胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮的含量均有所降低,其中尿素氮、胆固醇、甘油三酯、葡萄糖的含量与对照组差异达到显著(P<0.05)或极显著水平(P<0.01)。高温处理14 d后,除肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶的活性显著高于对照组外(P<0.01),其它酶与对照相比差异不显著(P>0.05);血清中Ca2+、K+的浓度显著低于对照组(P<0.05),Cl-、Na+的浓度与对照组差异不显著(P>0.05);尿素氮、胆固醇的含量与对照组差异达到显著水平(P<0.05)。以上研究表明:高温处理7 d、14 d,肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、K+浓度、尿素氮和胆固醇5个指标与对照相比均存在显著的变化,可作为大黄鱼对高温的反应指标。2、随着温度升高,2月龄大黄鱼的摄食及活动呈现先上升后下降的态势,大黄鱼开始死亡温度为33.0℃,半致死温度为35.5℃,致死温度为36.0℃。以本实验筛选出的耐热和不耐热大黄鱼为材料,采用BSA法从116个微卫星标记中筛选出7个产生差异条带的标记位点,经在耐热与不耐热各30个个体中验证,获得了3个与大黄鱼耐热性显著相关的标记(LYC0148、LYC0200、LYC0435),其中位点LYC0148和LYC0200扩增出的差异片段(182 bp和198 bp)在耐热组中出现的频率显著高于不耐热组(P<0.01);位点LYC0435扩增出的差异片段(103 bp和115 bp)在不耐热组中出现频率显著高于耐热组(P<0.01)。本研究结果可为大黄鱼的耐高温选育提供有用的分子标记。
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