局部氧疗联合封闭负压引流干预在Ⅲ期压疮中的实验研究

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本实验在构建Ⅲ期压疮豚鼠模型的基础上,观察局部氧疗联合封闭负压引流促进创面愈合的效果,探讨作用机理,并对其工作参数进行优化,以期对临床治疗Ⅲ期压疮提供新的思路和理论依据。本研究分为三部分。第一部分:构建Ⅲ期压疮豚鼠模型。选取21只清洁级雄性白色豚鼠,根据IR原理,利用自制建模装置对豚鼠(n=3)左侧大转子处间歇性施加不同压力(50mmHg、100mmHg、150mmHg、200mmHg、250mmHg和300mmHg)循环,诱导Ⅲ期压疮的形成,从肉眼、组织病理和行为学三方面对模型进行评价。结果显示:各实验组创面颜色及形态学特征相似,但出现时间与压强大小成反比。组织HE染色显示不同程度的病理损害特征,如结构层次模糊、炎症细胞聚集、肌横纹模糊或消失、血管瘀滞、肌肉组织变性、自溶等,B组<C~D组<E~G组最重。与对照组比较,实验组豚鼠的饮食量、饮水量及体质量变化量有显著的差异(P<0.01);随着施加的压强增加,豚鼠外观、精神状态、步态和性情逐步出现异常。第二部分:局部氧疗联合封闭负压引流干预促进豚鼠Ⅲ期压疮创面愈合研究。选取20只清洁级雄性白色豚鼠,在左侧大转子处构建Ⅲ期压疮创面,方法同第一部分。20个创面随机分为五组:A组(持续-125mmHg负压治疗320min后给予5L/min的局部氧疗160min)、B组(-125mmHg负压治疗40min,5L/min的局部氧疗20min,交替8次)、C组(-125mmHg负压治疗40min后暂停20min,重复8次)、D组(5L/min的局部氧疗20min后暂停40min,重复8次)、E组(对照组)。在创面形成第0、1、3、7、11d测量创面面积,计算创面面积收缩率;在各时相点切取创面标本,组织学观察组织水肿和炎细胞浸润;测定创缘组织中VEGF和MVD的平均光密度值。结果显示:①各组创面面积收缩率比较:实验组(A~D组)均高于对照组(均P<0.001),联合干预组(A~B组)高于VAC组和TOT组(均P<0.001),且交替联合干预组高于序贯联合干预组(P<0.001),VAC组和TOT组无显著差异(P>0.05)。干预11天后,各组创面面积收缩率从大至小顺序依次为B组>A组>D组>C组>E组,其中B组创面已愈合;②VEGF:A~B组VEGF的表达高于C组(均P<0.001),C组高于D~E组(均P<0.001),而D组和E组VEGF表达水平很低,之间无显著差异(P>0.05);③MVD:A~B组MVD的表达高于C~D组(均P<0.001),C组和D组之间无显著差异(P>0.05),但均高于对照组(均P<0.001)。第三部分:局部给氧联合封闭负压引流工作参数优化实验。选取23只清洁级雄性白色豚鼠,构建Ⅲ期压疮豚鼠模型,方法同第一部分。采用均匀实验设计和多元回归分析,考察VAC和TOT交替联合干预方法的负压强度、氧流量、一小时内TOT的工作时间和干预频次对日平均创面面积收缩率的影响。结果显示:VAC和TOT联合干预优化工作条件为干预频次12次/日、一小时内TOT干预时间50min、VAC负压强度-125mmHg和TOT氧流量10L/min。通过上述实验得出结论:①在100mmHg的压强下,采取IR方式(缺血2h,再灌注0.5h)循环反复施加于豚鼠左侧大转子处,每天循环4次,连续12次(3d),后接5d硬痂下感染溶解期,可稳定重现Ⅲ期压疮创面,且对豚鼠行为学影响较小,可用于需长期观察的压疮研究。②VAC和TOT联合干预疗法能显著促进Ⅲ期压疮创面的愈合,比VAC疗法和TOT疗法更有效。③VAC和TOT交替联合干预疗法促进Ⅲ期压疮创面的愈合的效果优于VAC和TOT序贯联合干预疗法。④VAC和TOT单一疗法的疗效相同,且均优于空白对照组。⑤VAC和TOT联合干预疗法可迅速地减轻创面炎症反应,促进VEGF和MVD的表达,提高创面血管化程度,加速Ⅲ期压疮愈合。⑥VAC和TOT交替联合干预方法的优化工作条件为干预频次12次/日、一小时内TOT干预时间50min、VAC负压强度-125mmHg和TOT氧流量10L/min。
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