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目的： 1.研究富含血管内皮细胞生长因子受体1（vascular endothelial growth factor receptor1，VEGFR1）和ATP运转蛋白C3（ATP-box cassette transporter C3， ABCC3）抗体的血浆对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。 2.探讨富含VEGFR1和ABCC3抗体的血浆抑制胰腺癌细胞增殖的机制。 方法： 1.抗原设计：从美国国立生物技术信息中心（national center for biotechnology information，NCBI）数据库检索VEGFR1的完整氨基酸序列，使用人类主要组织相容性复合体Ⅱ类抗原（major histocompatibility complex-Ⅱ，MHC-II）表位工具NetMHCIIpan分析VEGFR1和ABCC3序列，从VEGFR1和ABCC3的保守性和与MHC-II的亲和性两方面对多肽抗原进行评价，设计适宜的多肽序列抗原，分别命名为NPAV1和HLS-C3。 2.血浆的筛选：从150名健康献血者中，用酶联免疫吸附法（ELISA）分别筛选NPAV1和HLS-C3二种抗原多肽对应的天然自身抗体的健康人血浆，分别命名为V1和C3血浆，在V1和C3血浆中，分别再筛选富含和低含VEGFR1和ABCC3天然自身抗体的健康人血浆。每种富含天然自身抗体的血浆分为A、B两组，分别来源于富含VEGFR1和ABCC3天然自身抗体排名靠前的两个健康献血者血浆；低含VEGFR1和ABCC3天然自身抗体排名靠后的两个健康献血者血浆混合后组成N组。 3. V1和C3血浆对胰腺癌细胞增殖的影响：分别用15%浓度的V1和C3二种血浆处理胰腺癌PANC-1、BXPC-3、SW1990细胞24和48小时，然后测定三株胰腺癌细胞的增殖，计算细胞活度。观察二种血浆对三种癌细胞增殖的影响，从而选择对细胞抑制作用最强的血浆。 4. V1血浆对胰腺癌细胞凋亡的影响：用15%浓度的富含和低含VEGFR1天然自身抗体的血浆处理胰腺癌PANC-1、BXPC-3、SW1990细胞，用富含VEGFR1 天然自身抗体血浆处理的细胞作为实验组，低含VEGFR1天然自身抗体血浆处理的细胞作为对照组，分别于24和48小时后收集细胞，然后进行碘化丙啶（propidine iodide，PI）和异硫氰酸荧光素（flourescein iso-thiocyanate，FITC）染色，再用流式细胞仪检测三株胰腺癌细胞的凋亡情况。 5. V1血浆对胰腺癌细胞周期的影响：用15%浓度的富含和低含VEGFR1天然自身抗体的血浆处理胰腺癌PANC-1、BXPC-3、SW1990细胞，用富含VEGFR1天然自身抗体血浆处理的细胞作为实验组，低含VEGFR1天然自身抗体血浆处理的细胞作为对照组，分别于24和48小时后收集细胞，然后进行碘化丙啶（propidine iodide，PI）染色，再用流式细胞仪检测三株胰腺癌细胞周期情况。 6.胰腺癌细胞VEGFR1的mRNA的表达：分别提取胰腺癌PANC-1、BXPC-3、SW1990细胞总RNA，用实时定量PCR扩增分析三种癌细胞VEGFR1的mRNA的表达。 结果： 1.血浆对胰腺癌细胞增殖的影响：分别用富含VEGFR1和ABCC3天然自身抗体的V1和C3血浆处理PANC-1、BXPC-3、SW1990细胞48小时，结果显示富含VEGFR1和ABCC3天然自身抗体的V1和C3二种血浆对PANC-1和BXPC-3细胞的增殖均有抑制作用，富含 VEGFR1天然自身抗体的 V1血浆的抑制效果高于富含ABCC3天然自身抗体的C3血浆。因此，选择V1血浆用于后续的细胞凋亡和细胞周期实验。 2. V1血浆对胰腺癌细胞凋亡的影响：用富含和低含VEGFR1天然自身抗体的V1血浆作用于三株胰腺癌细胞24和48h，结果显示实验组的PANC-1和BXPC-3细胞凋亡百分率显著高于对照组，但是实验组的SW1990细胞凋亡百分率与对照组比较未见统计学差异，说明富含VEGFR1天然自身抗体的V1血浆能够促进PANC-1和BXPC-3细胞的凋亡，但是对SW1990细胞的凋亡不产生影响。 3. V1血浆对胰腺癌细胞周期的影响：用富含和低含VEGFR1天然自身抗体的V1血浆作用于三株胰腺癌细胞，分别培养至24和48h，结果显示实验组各细胞周期的细胞百分率与对照组相比未见显著性差异（P>0.05）；说明富含VEGFR1天然自身抗体的V1血浆对胰腺癌细胞的细胞周期不产生影响。 4. VEGFR1的mRNA在胰腺癌细胞中的表达：VEGFR1的mRNA在PANC-1 细胞上的表达量显著高于SW1990和BXPC-3细胞，而在BXPC-3细胞上的表达量最低。 结论： 1.富含 VEGFR1和 ABCC3天然自身抗体的血浆对胰腺癌细胞 PANC-1、BXPC-3具有抑制作用。 2.富含VEGFR1天然自身抗体的血浆能促进胰腺癌细胞PANC-1和BXPC-3的细胞凋亡。