甲醛对雌性小鼠生殖细胞影响的研究

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[目的] 通过对雌性昆明种小鼠经腹腔注射甲醛(Formaldehyde)后,了解甲醛对动物的一般中毒情况及动情周期的变化;观察卵巢的病理组织结构和卵母细胞超微结构的变化;测定卵巢组织中GSH含量;测定血清中E2、LH水平;研究甲醛对卵母细胞遗传物质的影响,并初步探讨甲醛致卵母细胞遗传物质损伤的机理;寻找环境中甲醛对雌性动物生殖细胞影响的有效监测指标。 [方法] 选用雌性昆明种小鼠为研究对象。动物染毒的甲醛低、中、高剂量分别为1.25mg/kg·bw、2.50mg/kg·bw、5.00mg/kg·bw。采用腹腔注射染毒,每天1次,连续5d。第6d处死一批小鼠,用HE染色观察小鼠卵巢组织的病理改变,用醋酸铀—醋酸铅双重染色电镜下观察小鼠卵母细胞超微结构的损伤;用GSH测定试剂盒(还原型)测定小鼠卵巢组织中的GSH含量;用E2和LH放射免疫分析试剂盒分别测定小鼠血清中E2及LH水平;采用超排卵法,计数超排卵数并收集卵母细胞,于油镜下观察生殖细胞遗传物质的损伤。余下的小鼠继续染毒5d后再观察15d,从染毒开始到实验结束,每天对阴道脱落细胞进行检查,以观察动情周期的变化。 [结果] 1.甲醛的中、高剂量组导致雌性小鼠的动情期缩短,动情周期延长且明显不规则,尤以高剂量组更为显著;2.甲醛的中、高剂量组卵巢组织的病理改变:以部分成熟卵泡的变性为主,伴有间质小血管扩张充血,黄体细胞增大变空及纤维组织增生;3.电镜下观察可见:甲醛的中、高剂量组卵母细胞崩解液化,周边的卵丘细胞内线粒体肿胀及空泡变;4.高剂量组的甲醛使小鼠卵巢组织中的GSH含量、血清中的E2水平明显下降,与各研究组比较差异均有显著性(p<0.01);而血清LH水平虽有所下降,但各研究组间差异并王伟硕士学位论文 摘要无显著性b>0.-05)5.甲醛可使卵母细胞染色体畸变跳高,具有明显的剂量一反应关系。同时,甲醛的高剂量组具有非整倍体诱变性。 【结论]二.甲醛可造成卵巢病理组织及卵母纫胞超微结构的损伤。2.甲醛可导致雌性小鼠生殖内分泌功能低下,动情周期不规则。3.甲醛可诱致卵母细胞染色体畸变率增高,表示遗传物质的损伤。4.胺质过氧化可能是甲醛导致卵母细胞遗传物质损伤的机理之一。5.小鼠动情周期的变化,可以作为监测和筛选环境中甲醛对摊性动物生殖细胞影响的一种方便而有效的指标。
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