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[目的]肥胖是生物体内脂质过多的状态,当下肥胖已成为世界性的流行性疾病,并呈急剧上升趋势,是糖尿病、心血管疾病及某些癌症发生的危险因素。FKBP51作为免疫亲和蛋白的一种,通过与伴侣蛋白结合并与GR复合体共同作用在机体的糖脂代谢中起到重要的调节作用。我们的前期研究发现,敲除FKBP51可以抑制小鼠体内脂肪细胞的分化合成,抵制高脂饮食诱导的脂肪积累,但对具体的分子机制还缺乏了解。本论文在成功创建高脂模型的基础上,探究FKBP51在脂质代谢中的作用,以期寻找预防和治疗肥胖的新靶点。[方法]将四周龄小鼠按照基因型分为以下四组:正常饮食野生雄鼠(RDWT)、高脂饮食野生雄鼠(HFWT)、正常饮食FKBP51KO雄鼠(RDKO)、高脂饮食FKBP51KO雄鼠(HFKO),每组6只小鼠。1)体重测量:分组前先称量小鼠初始体重,分组高脂喂养后每周记录一次小鼠体重,持续至十周龄;2)通过PET-CT对高脂喂养下的FKBP51 WT和KO小鼠体内的葡萄糖代谢进行测定,运用软件计算分析小鼠体内葡萄糖代谢程度;3)RNA-seq测序分析RNA表达谱差异:分别提取四组小鼠肝脏组织的RNA,利用第二代测序技术,对RDWT、HF WT、RDKO及HFKO四组小鼠的肝脏RNA进行测序分析,探究FKBP5KO小鼠和WT小鼠在正常饮食和高脂饮食条件下基因表达的差异;4)利用Real-time PCR技术,对测序结果筛选出的相关分子GCK、Cyp21al、Cyp4a10、Cyp4a14在mRNA水平的进行验证;5)电镜观察线粒体:通过电镜观察RD WT、HF WT、RDKO及HFKO四组小鼠的肝脏组织并拍照,利用软件对每组线粒体的面积进行测量,并分析每组线粒体之间的大小变化,并进一步通过高倍电镜观察线粒体自噬情况;6)利用Western Blot技术对自噬及线粒体自噬相关分子在四组小鼠全蛋白和线粒体蛋白中的表达进行检测;7)Co-IP实验:探究FKBP51与Parkin在蛋白水平的相互作用;8)通过干扰和过表达FKBP51基因的表达检测Parkin的变化。[结果]1)对小鼠每周的体重进行统计分析,发现高脂饲养条件下,HFKO组小鼠体重明显低于HF WT小鼠;2)PET-CT结果显示FKBP51 KO小鼠体内葡萄糖代谢程度高;3)RNA-seq分析结果表明:FKBP51的敲除主要导致肝脏中代谢过程相关基因表达变化;4)通过Real-time PCR对代谢途径的相关分子检测,发现RDKO组中GCK表达量显著高于RDWT组,Cyp21al、Cyp4a10和Cyp4a14的表达量显著低于RDWT组。这些结果均说明当FKBP51基因敲除后,小鼠体内代谢水平升高;5)通过透射电镜观察,发现HF WT组小鼠线粒体变形、增大甚至破裂坏死,但HFKO组小鼠线粒体损伤不明显;线粒体面积测量结果显示,RDKO组和HFKO的肝脏线粒体分别大于RDWT和HFWT组;进一步通过高倍电镜观察发现HF KO组小鼠的线粒体自噬情况较HF WT组严重;6)利用WesternBlot技术对自噬及线粒体自噬相关分子检测,结果显示FKBP51基因的缺失导致自噬及线粒体自噬蛋白表达水平升高;7)Co-IP实验结果显示FKBP51和Parkin在蛋白水平存在直接的相互作用;8)在SY5Y细胞内发现,降低FKBP51的表达会造成Parkin表达升高,在H293细胞中升高FKBP51的表达会造成Parkin表达降低。[结论]在FKBP51基因敲除雄鼠中,FKBP51基因的缺失影响了肝脏中代谢过程相关基因的表达,改变了肝脏中线粒体的大小及自噬水平,从而抵抗高脂诱导的肥胖。