【摘 要】
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目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后白细胞髓过氧化物酶活性的动态变化和白细胞浸润情况及病理形态学变化;相关粘附分子ICAM-1、P-选择素、E-选择素mRNA和蛋白的表达部位
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目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后白细胞髓过氧化物酶活性的动态变化和白细胞浸润情况及病理形态学变化;相关粘附分子ICAM-1、P-选择素、E-选择素mRNA和蛋白的表达部位及其动态变化,以及星形胶质细胞反应,探讨粘附分子和中性粒细胞介导的脑缺血再灌注炎症损伤的免疫机制,以及早期针刺治疗的干预作用机理。 方法 用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,将245只成年雄性Wistar大鼠造模成功的动物随机分成随机分为再灌注后3h、6h、12h、24h、48h 5个时间点,每个时间点又分为假手术组、模型组、非穴位针刺组(非穴组)、传统取穴针刺组(传统组)、醒脑开窍针刺组(醒脑组)等五组,共25组,每组6—13只动物。醒脑组选取水沟、内关、三阴交;传统组选取曲池、足三里穴,非穴组选取双侧胁下2个固定非穴点,进行电脉冲刺激。分别在相应的时间取材。 观察和检测指标:(1)用神经行为学指标观察神经症状改善情况;(2)通过TTC染色、HE染色、甲苯胺蓝染色和电镜检测进行病理形态学动态观察;(3)用分光光度计测定OD值法检测缺血侧皮层和纹状体新鲜组织白细胞髓过氧化物酶(MPO)活性的动态变化;(4)采用原位杂交方法检测再灌注后相关粘附分子ICAM-1、P、E-选择素mRNA的表达;(5)应用免疫组织化学技术检测脑缺血区GFAP和粘附分子ICAM-1、P、E-选择素的蛋白时空表达规律;(6)应用计算机图象分析系统进行图像分析。 结果 1.TTC染色观察到MCAO模型的梗死部位主要局限于额顶叶皮质和纹状体等区域,再灌注24h梗死面积达到峰值,48h梗死灶开始软化坏死。 2.HE染色镜下观察显示:缺血再灌注6h开始,缺血侧皮质和纹状体缺血半暗区出现白细胞(以多形核白细胞为主)的粘附及浸润,并逐渐加剧,同时坏死灶中
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