内质网应激在PolyG干预大鼠矽肺纤维化中的作用

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背景矽肺是由于在生产过程中长期吸入大量游离二氧化硅粉尘而引起的一种严重的职业病,其病理损伤主要表现为肺组织的炎症以及弥漫性间质纤维化病变[1]。关于矽肺纤维化发生的机制,学者们投入大量研究,提出了多种假说,其中细胞的凋亡被认为是导致矽肺纤维化发生的重要机制之一。内质网应激是介导细胞凋亡的重要通路之一,且被证明与多种疾病有关,但是针对它与矽肺纤维化之间关系的研究还寥寥无几。课题组前期研究发现,多聚鸟嘌呤核苷酸(Polymers guanine nucleotides,PolyG)对大鼠的矽肺纤维化有预防和治疗作用,然而其干预矽肺纤维化发生的具体机制尚不十分清楚。目的探讨内质网应激在PolyG干预大鼠矽肺纤维化中的作用及机制。方法将96只SD大鼠按体重随机分为生理盐水组、矽肺模型组、PolyG预防组和PolyG治疗组,除生理盐水组外,其他各组均采用吸入式气管滴注法建造矽肺纤维化大鼠模型。PolyG预防组于染尘当天给予PloyG干预,分别在给药后第28天、第56天处死大鼠各8只;PolyG治疗组于染尘后第28天给予PloyG干预,分别在给药后第28天、第56天处死大鼠各8只。预防性干预及治疗性干预均设置生理盐水组与矽肺模型组,作为对照。HE染色及Masson染色观察肺组织病理改变,以Western Blot法测定Ⅰ型和Ⅲ型胶原、内质网应激与凋亡相关蛋白GRP78、IRE1、CHOP、PERK、ATF6、Casepase12及Casepase3的表达水平。结果1.生理盐水组肺组织结构正常,部分有轻度炎症,无矽结节及胶原沉积;矽肺模型组肺组织肺泡结构破坏严重,出现大量细胞性结节及胶原沉积,大部分大鼠有典型矽结节形成,随着染尘后时间的延长,矽结节逐渐融合,并形成团块;PolyG预防组及PolyG治疗组矽结节及胶原沉积均较矽肺模型组减少,多数结节消失,仅呈现炎症表现。2.预防性给药后第28天和第56天,PolyG预防组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、GRP78、IRE1、CHOP、PERK、ATF6、Caspase-12及Caspase-3的表达水平均低于同期矽肺模型组(P均<0.05),给药后第56天PolyG预防组内质网应激及凋亡各蛋白的表达量均较第28天降低,但差异无统计学意义(P均>0.05)。3.治疗性给药后第28天及第56天,PolyG治疗组大鼠肺组织各蛋白的表达水平均低于矽肺模型组(P均<0.05),给药后第56天PolyG治疗组内质网应激及凋亡各蛋白的表达量均较第28天降低,但差异无统计学意义(P均>0.05)。4.给药后第28天PolyG治疗组Ⅰ、Ⅲ型胶原、GRP78、Caspase-12、PERK、ATF6及Caspase-3蛋白较预防组升高(P均<0.05),给药后第56天,PolyG治疗组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、Caspase-12、ATF6及Caspase-3蛋白较预防组升高(P均<0.05)。结论内质网应激参与了PolyG干预大鼠矽肺纤维化的过程,PolyG可以有效预防和治疗矽肺纤维化,近期及远期效果均较好,且预防性使用PolyG效果更佳。
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