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目的:对流式细胞术(FCM)检测血浆血管内皮生长因子(VEGF)、P选择素(P-selectin)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)等炎症性标志物进行方法学性能评价,并观察三种标志物在心血管疾病诊断中的应用。 方法:参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)[1]系列文件和相关文献,结合工作实际,设计验证方案,对BD Arria流式细胞仪检测系统测定血浆VEGF、P-selectin和VCAM-1的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、回收率和生物可参考区间6大分析性能进行验证和评价,并将实验结果与厂家(美国BD公司)提供的分析指标或公认的质量指标进行比较。同时,对患有冠心病的患者标本进行浓度检测,观察浓度范围与患病程度的关系和相关性。 结果:VEGF含量在9.77、625.00 ng/L时,批内变异系数分别为4.70%和4.32%,批间变异系数分别为4.87%和6.76%;P-selectin含量在39.06和10000.00 ng/L时,批内变异系数分别为4.23%和9.00%,批间变异系数分别为4.63%和11.00%; VCAM-1含量在39.06和10000.00 ng/L时,批内变异系数分别为4.28%和7.97%,批间变异系数分别为4.76%和10.32%。VEGF在9.77和625.00ng/L的两个浓度时的相对偏倚分别为2.10%和3.58%,P-selectin在39.06和10000.00 ng/L时两个浓度的相对偏倚分别为2.71%和5.28%,VCAM-1在39.06和10000.00 ng/L两个浓度的相对偏倚分别为4.72%和6.52%。VEGF的检测灵敏度为12.62 ng/L,P-selectin的检测灵敏度为15.78 ng/L, VCAM-1的检测灵敏度为11.67ng/L。VEGF的分析测量范围为12.62~2190.00ng/L,P-selectin的分析测量范围为15.78~103928.00 ng/L,VCAM-1的分析测量范围为11.67~762590.00ng/L。生物参考区间验证结果:VEGF为59.30ng/L~96.80 ng/L,P-selectin为4512.20ng/L~10250.00ng/L,VCAM-1为4765.00ng/L~15725.00ng/L。VEGF在正常人、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死范围时的浓度范围分别是78.10±18.70ng/L、365.40±76.10 ng/L、828.30±119.40 ng/L和1639.50±299.00 ng/L;P-selectin在正常人、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死范围时的浓度范围分别是4512.20±2848.60 ng/L、54020.10±3390.10 ng/L、70979.80±2818.60 ng/L和83189.80±7226.30 ng/L; VCAM-1在正常人、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死范围时的浓度范围分别是10448.10±3368.40 ng/L、524490.60±37324.50 ng/L、624929.00±30195.70 ng/L和715688.60±24844.40 ng/L。 结论:BD Aria流式细胞仪检测系统检测血浆VEGF、P-selectin和VCAM-1的分析性能符合厂家提供的性能指标和公认的质量指标,本研究对建立一个完整的流式细胞术质量保证体系具有重要意义。通过流式细胞术检测血浆VEGF、P-selectin和VCAM-1的浓度值,在对照组、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛和心肌梗死有明显的浓度差异,且其值呈递增趋势,对冠脉综合征的诊断具有-定临床应用价值。