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目的：探讨非甾体抗炎药阿司匹林对人结肠癌细胞株Caco-2生长增殖作用及其预防结肠癌发生的可能机制。方法：1.无血清培养法富集Caco-2细胞中肿瘤干细胞；2.流式细胞术测定Caco-2细胞CD24表达；3.采用噻唑蓝(MTT)比色法检测阿司匹林对Caco-2细胞生长增殖的影响；4.流式细胞术分析不同浓度药物对Caco-2细胞凋亡的影响；5.实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Caco-2细胞中Lgr5和CD24mRNA的表达；6.免疫组化Envison法检测不同浓度药物对Caco-2细胞中Lgr5蛋白表达的影响。结果：1. Caco-2细胞在SFM中可产生悬浮肿瘤球,加入SSM后细胞可再贴壁生长；2.流式细胞仪结果显示结肠癌细胞株Caco-2中CD24为阴性表达；3.MTT结果显示阿司匹林对Caco-2细胞生长增殖的抑制率逐渐增加,呈明显的时间和剂量依赖性；4. AnnexinV/PI双染法检测Caco-2细胞凋亡的结果显示：阿司匹林对Caco-2细胞促凋亡作用(包括早期凋亡和总凋亡)呈明显的剂量和时间依赖性,不同浓度组和时间组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；5.RT-PCR结果显示应用阿司匹林干预不同时间后,Caco-2细胞中Lgr5mRNA的表达均较对照组降低,不同时间组与对照组比较均具有统计学意义(P＜0.05)；6.免疫组化结果显示,Lgr5在结肠癌细胞Caco-2的细胞浆和细胞膜表达,其中大部分定位于细胞质,少数定位于细胞膜,未见细胞核表达；对照组和5mmol/L阿司匹林组平均光密度分别为0.191±0.031,0.182±0.041,5mmol/L阿司匹林组与对照组相比,差异无统计学意义.05),10mmol/L和15mmol/L阿司匹林组可见细胞膜、细胞质和细胞核均被着色。结论：1.结肠癌Caco-2细胞在无血清培养基中可以生成悬浮的肿瘤细胞球；2.结肠癌Caco-2细胞CD24为阴性表达；3. NSAIDs阿司匹林分别呈时间和剂量依赖性地抑制体外培养的结肠癌Caco-2细胞的生长增殖以及促进细胞凋亡,其机制可能是通过抑制Lgr5基因的表达；4.Lgr5在体外培养的结肠癌Caco-2细胞的细胞质和细胞膜大量表达,以细胞质为主,小剂量阿司匹林对Lgr5的表达量未见明显影响,中、高剂量阿司匹林可影响Lgr5定位表达,可能是由于药物对细胞的毒性作用所致。