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目的:本研究通过建立大鼠单侧输尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction)模型，检测wnt信号通路蛋白wnt1、β连环蛋白(β-catenin)，α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)等蛋白及基因的表达，从而探讨清化固肾排毒颗粒对肾间质纤维化的保护作用以及其对wnt信号通路的作用机制。 方法:将72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组和造模组，造模组采取单侧输尿管结扎，造模后再随机分为UUO模型组、洛丁新组、中药组，每组SD大鼠18只。中药组予以清化固肾排毒颗粒1.5g/kg.d溶于生理盐水中灌胃，西药组予以洛丁新片1.6mg/kg.d溶于生理盐水中灌胃，假手术组和模型组予以生理盐水灌胃，每日一次。分别于造模后的第7、14、21天时随机处死每组中的6只大鼠，心脏取血检测血清尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)和肌酐(serumcreatinine，SCr)、并留取梗阻侧肾脏组织进行相关病理检测。分别采用苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色）和Masson染色评价肾小管损伤情况和肾间质纤维化程度，运用免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR以及Westem Blot技术检测肾脏组织wnt1、β-catenin、α-SMA、TGF-β1的蛋白和mRNA在肾组织中的表达情况。 结果: 1.清化固肾排毒颗粒对UUO大鼠肾脏病理的影响(1) HE染色结果:假手术组未见明显病理改变。模型组肾脏可见肾小管管腔扩张、间质增宽，小管上皮细胞变性、萎缩、坏死、脱落以及炎性细胞浸润，肾间质纤维化，随着梗阻时间延长，损伤程度进一步加重。洛丁新组、中药组肾小管上皮细胞变性、坏死、萎缩程度和间质纤维化程度较模型组轻(P＜0.05)，肾小管损伤程度评分明显减少(P＜0.05)，中药组与洛丁新组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(2) Masson染色结果:在假手术组，肾组织masson染色未见明显病理改变，仅见少量线状蓝染的胶原组织。在模型组，可见肾小囊、肾小管基膜及间质出现明显蓝染的胶原组织(P＜0.05)，随着梗阻时间的延长，肾间质中蓝染的成分逐渐增多，提示纤维化程度进行性加重。中药组及洛丁新组Masson评分，较模型组明显减少(P＜0.05)，中药组与洛丁新组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 2.清化固肾排毒颗粒对UUO大鼠肾功能的影响与假手术组比较，模型组大鼠 SCr、BUN均明显升高(P＜0.05);与模型组比较，中药组和洛丁新组SCr、BUN均明显降低(P＜0.05)，中药组与洛丁新组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 3.对大鼠24 hUP的影响各组大鼠24 hUP量差异无统计学意义(P＞0.05)，随着时间的延长，各组大鼠24 hUP量变化差异无统计学意义(P＞0.05)。 4.免疫组织化学染色结果:与假手术组比较，各模组大鼠肾组织TGF-β1、α-SMA、β-catenin表达明显增多(P＜0.05)，随着输尿管梗阻时间延长，各指标程度加重;与模型组比较，中药组、洛丁新组大鼠的TGF-β1、α-SMA、β-catenin表达降低(P＜0.05); Wnt1免疫组化结果显示:与假手术组比较，各造模组大鼠肾小管上皮细胞内wnt1高表达(P＜0.05)，在梗阻后第7天wnt1表达量最高(P＜0.05)，随后降低，中药组与洛丁新组比较，各指标差异无统计学意义(P＞0.05)。 5.实时荧光定量PCR结果与假手术组比较，各模组大鼠肾组织TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA，β-catenin mRNA表达明显增多(P＜0.05)，随着输尿管梗阻时间延长，各指标程度加重;与模型组比较，中药组、洛丁新组大鼠的TGF-β1mRNA、α-SMAmRNA、β-catenin mRNA表达降低(P＜0.05)。Wnt1 mRNA结果显示:与假手术组比较，各造模组大鼠肾小管上皮细胞内wnt1 mRNA高表达(P＜0.05)，在梗阻后第7天wnt1mRNA表达量最高(P＜0.05)，随后降低;与模型组比较，中药组、洛丁新组大鼠wnt1mRNA表达降低(P＜0.05);中药组与洛丁新组比较，各指标差异无统计学意义(P＞0.05) 6.Westem Blot结果与假手术组比较，各模组大鼠肾组织β-catenin蛋白含量表达明显增多（P＜0.05)，随着输尿管梗阻时间延长，表达程度加重;与模型组比较，中药组、洛丁新组大鼠的β-catenin蛋白含量表达降低（P＜0.05）。Wnt1结果显示:与假手术组比较，各造模组大鼠肾小管上皮细胞内wnt1蛋白含量高表达（P＜0.05)，在梗阻后第7天wnt1表达量最高(P0.05)，随后降低;与模型组比较，中药组、洛丁新组大鼠wnt1蛋白含量表达降低（P＜0.05)，中药组与洛丁新组比较，各指标差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论: 1、成功建立单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化模型; 2、清化固肾排毒颗粒能够对UUO大鼠肾脏具有一定的保护作用，一定程度改善肾功能及肾脏病理，能够降低大鼠血清BUN、Scr水平，延缓肾纤维化程度; 3、清化固肾排毒颗粒能够抑制大鼠肾脏α-SMA、TGF-β1蛋白和基因的表达，其作用机制可能是通过下调TGF-β1、α-SMA的表达，从而抑制EMT和ECM的积聚，达到抗肾纤维化的作用; 4、清化固肾排毒颗粒能够降低大鼠肾脏wnt1、β-catenin蛋白和基因的表达，其作用机制可能是通过抑制wnt信号通路中蛋白的表达，从而达到肾脏保护的作用。