基于HPLC指纹图谱分析与多指标成分含量测定的羌活质量评价研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nihaosww
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中药羌活原植物为伞形科羌活属植物羌活和宽叶羌活,为我国特有植物,主要分布于青藏高原东缘的川西北、青海、甘肃、云南一带,入药部位为其干燥根茎和根。有机酸和香豆素是羌活中重要的两类活性成分,现有文献报道大多仅测定其中的一种或少数几种活性成分,而中药的疗效是多种成分协同作用的结果,单一活性成分含量分析不足以全面、客观、真实地反映羌活药材的质量。本研究采用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)测定了不同基源植物、不同产地、不同采收月份、不同部位、不同商品等级羌活药材中2种有机酸(绿原酸和阿魏酸)和6种香豆素类化合物(紫花前胡苷、补骨脂素、佛手柑内酯、欧前胡素、羌活醇和异欧前胡素)的含量,并通过活性成分含量与环境因子的相关性分析,初步探讨生态环境因子与羌活药材品质的相关性,为羌活药材的人工引种栽培提供实验依据;同时,本文分别建立了青海、四川、甘肃等产地25批羌活和30批宽叶羌活药材的高效液相色谱指纹图谱,以期为羌活药材的质量控制和真伪鉴别提供科学依据。结果如下:   1.不同产地羌活和宽叶羌活样品中均检测出绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷、佛手柑内酯、羌活醇和异欧前胡素这6种成分,补骨脂素仅存在部分样品中少量存在,所有样品中均未检测出欧前胡素。羌活中含量较高的3种成分依次为羌活醇、绿原酸和异欧前胡素,宽叶羌活中含量较高的3种成分依次为紫花前胡苷、异欧前胡素和绿原酸。羌活中羌活醇含量约为宽叶羌活的16倍,平均含量分别为13.209 mg/g和0.824 mg/g;宽叶羌活中异欧前胡素的含量约为羌活的3倍,分别为19.563 mg/g和6.117 mg/g,紫花前胡苷的含量约为羌活的38倍,分别为48.480 mg/g和1.272 mg/g。   2.分别建立了羌活和宽叶羌活的高效液相色谱指纹图谱。对25批不同来源的羌活药材色谱图进行多点校正和自动匹配,确定了16个共有峰,25批羌活药材中有22批与共有模式指纹图谱的相似度均大于0.9,共有峰所占比例平均值为84.31%。30批不同来源的宽叶羌活色谱图经自动匹配后,确定了19个共有峰,30批样品中有28批与共有模式指纹图谱的相似度大于0.9,共有峰所占比例平均值为96.49%,可用于羌活药材的质量控制和真伪鉴别。   3.通过对不同时间采收的(5月、6月、7月、8月和9月)野生和栽培的羌活和宽叶羌活中2种有机酸和6种香豆素含量的测定分析,结果表明,羌活和宽叶羌活、野生样品和栽培样品之间活性成分含量的季节动态变化存在一定的差异,但快速生长期(6月或7月)含量一般会急剧下降,枯叶期(8月或9月)至第二年春天(5月或者6月),活性成分存在一个积累的过程。总体上与药典中规定的春秋二季采挖基本一致,生产采收时应密切结合当地的气候条件和药材的生长状况。   4.通过对羌活和宽叶羌活不同部位(根、茎、叶片、叶柄和种子)中有机酸和香豆素类化合物的分析表明,羌活和宽叶羌活根部活性成分的总含量均显著高于其他部位,门源和乐都产羌活根部活性成分总含量比其他部位分别高5.4~38.4倍和4.7~21.8倍,宽叶羌活根部活性成分总含量比其他部位分别高4.9~10.5倍和4.5~22.1倍,这与传统上以其根茎及根入药相符。含量较高的羌活醇、异欧前胡素、紫花前胡苷主要富集于根部,绿原酸在全草中均有分布,其他成分在全草中含量均较低。   5.不同商品等级(蚕羌、竹节羌、大头羌、条羌和等外品须根)的羌活中,绿原酸、阿魏酸的含量与传统评价方法基本一致;但紫花前胡苷、佛手柑内酯、羌活醇和异欧前胡素的含量与传统的以外观形态论品质的判断标准有一定的差异,条羌、须根中的含量反而高于蚕羌、竹节羌、大头羌中的含量。尤其需要指出的是药典规定的2种主要活性成分羌活醇和异欧前胡素在须根中的含量要显著高于其他商品等级。
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