【摘 要】
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目的:研究不同时间窗联合应用100μmol/L依达拉奉及3mg/L异丙酚后处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血-再灌注损伤的保护作用。 方法:取出生24小时以内新生SD乳鼠脑皮质细胞，体外
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目的:研究不同时间窗联合应用100μmol/L依达拉奉及3mg/L异丙酚后处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血-再灌注损伤的保护作用。 方法:取出生24小时以内新生SD乳鼠脑皮质细胞，体外原代培养至第七天，随机分为6组:A组（正常对照组）;B组（联合药物24小时对照组）;C组（谷氨酸损伤组）;D1组（再灌注后30分钟内依达拉奉、异丙酚联合后处理30分钟组）;D2组（再灌注后2小时依达拉奉、异丙酚联合后处理组）;D3组（再灌注后12小时依达拉奉、异丙酚联合后处理组）。B组培养至第7天换用依达拉奉、异丙酚培养基培养24小时后再换用正常培养基继续培养24小时;C、D1、D2、 D3组培养至第7天予200μ mol/L谷氨酸损伤30分钟，然后C组换用正常培养基继续培养24小时，D1组在再灌注后予依达拉奉、异丙酚混合培养基处理30分钟，D2组在再灌注后2h予依达拉奉、异丙酚混合药物培养基处理30分钟，D3组在再灌注后12h予依达拉奉、异丙酚混合药物培养基处理30分钟，其后三组均换用正常培养基继续培养24小时后观察神经细胞存活率（MTT法），测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活力、ATP酶活力、丙二醛(MDA)含量、细胞凋亡率和HE染色后倒置相差显微镜下观察细胞形态变化。 结果:正常对照组神经细胞存活率高于损伤组（P＜0.05）及后处理各组（P＞0.05），细胞凋亡率明显低于损伤组及后处理各组(P＜0.01)，LDH漏出率低于损伤组(P＜0.05)及后处理各组（P＞0.05），SOD活力明显高于损伤组及后处理各组（P＜0.01），ATP活力高于损伤组及2h和12h后处理组(P＜0.01)，也高于30分钟后处理组（P＞0.05）;MDA含量低于损伤组（P＜0.05）及后处理各组（P＞0.05）。同时，依达拉奉、异丙酚两种药物联合30分钟后处理组神经细胞存活率高于损伤组（P＜0.05）和其他后处理组（P＞0.05），细胞凋亡率低于损伤组（P＜0.01）及其他后处理组(P＜0.05); LDH漏出率低于损伤组（P＜0.05），虽低于其他后处理组（P＞0.05），无统计学意义;SOD活力明显高于损伤组及12h后处理组(P＜0.01);虽高于2h后处理组（P＞0.05），无统计学意义。ATP活力高于损伤组（P＜0.05）及其他后处理（P＞0.05）;MDA含量低于损伤组(P＜0.05)及其他后处理各组（P＞0.05）。2h后处理组和12h后处理组神经细胞存活率都不同程度高于损伤组，LDH漏出率、MDA含量和细胞凋亡率较损伤组低，SOD活力、ATP酶活力较损伤组高，但与损伤组相比较P＞0.05，且2h后处理组和12h后处理组相比较P＞0.05。HE染色后倒置相差显微镜下观察细胞形态见药物联合30分钟后处理组细胞形态受损较损伤组和其他后处理组轻。 结论:在乳鼠离体脑皮质细胞缺血再灌注后2h、12h给予100μmol/L依达拉奉及3mg/L异丙酚两种药物联合后处理对缺血再灌注损伤的脑细胞所产生的保护作用不明显;而在脑细胞缺血再灌注后30分钟内予以100μmol/L依达拉奉及3mg/L异丙酚两种药物联合后处理30分钟对脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用。
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