论文部分内容阅读
本课题为了揭示高胆固醇血症条件下Kca通道亚基基因表达水平是否发生了变化，应用半定量RT-PCR技术以及半定量Western Blot分别检测通道α、β 1亚基在mRNA转录水平和蛋白质翻译水平的变化，探讨了高胆固醇血症下Kca通道的负反馈机制失衡与Kca通道各亚基表达水平之间的关系，及DNA水平是否存在改变。主要实验结果：采用简单纯化的蛋白免疫和DNA疫苗免疫的方法，成功的制备了特异性较高的小鼠抗兔Kca通道β1亚基的多克隆抗血清和豚鼠抗兔Kca通道α亚基的多克隆抗血清。对兔高胆固醇血症SOD模型中SO组织的Kca通道α，β1亚基DNA拷贝数变化情况和亚基蛋白表达水平变化的研究结果揭示通道的组成成分的改变-β1/α亚基化学比的下降，其原因似与作为外界影响因素的高胆固醇血症下调了β1亚基数/通道，从而削弱了Kca通道发挥使膜超极化的作用相关，成为导致SO细胞[Ca2+]I的重要原因之一。应用RACE技术首次获得兔Kca通道β 1亚基的cDNA序列，该序列的获得，对于深入开展高胆固醇血症兔SOD的发生机制的研究具有重要意义。