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抗肿瘤药物靶向递送是应对常规化疗药物选择性差、毒副作用大和耐药性等问题主要途径之一。因无毒、无免疫原性、生物可降解等优点，白蛋白纳米粒子和DNA自组装体已被用作多种药物或分子传递系统的载体，但其缺乏靶向性。本文以多种上皮癌细胞表面高表达的MUC1粘蛋白的适体（M适体）为作为新型肿瘤靶向分子，将其分别修饰到载阿霉素(Dox)的白蛋白纳米粒子和DNA自组装纳米结构上，分别制备基于适体靶向的牛血清白蛋白(BSA)纳米粒子和DNA纳米自组装体的肿瘤靶向药物递送系统，并评价了其体外靶向性。主要内容及结果如下: 1、优化去溶剂法制备粒径可控的BSA纳米粒子 以粒径、粒径分布、Zeta电位和电镜显微形貌为主要指标，分别考察了去溶剂法制备BSA纳米粒子时9个可能对粒径大小有影响的因素。结果发现:控制BSA溶液初始浓度，在较高pH和低离子强度下，无水乙醇滴加体积在2～4倍，搅拌速率较快时，加入1×标准量戊二醛进行交联，在超声辅助下，不同于以往，仅需要4～12h即能制备出粒径可控、粒径分布窄、稳定性好的白蛋白纳米粒子，明显缩短了制备周期。 2、BSA纳米粒子的稳定性考察 以粒径、粒径分布、Zeta电位和透射电镜显微形貌为指标，分别考察了BSA纳米粒子在纯水、NaCl溶液、PBS和含10％血清的PBS、带正电荷的多聚赖氨酸(PLL)溶液中的稳定性。结果发现:随着在水中贮存时间延长，BSA纳米粒子平均粒径有增加趋势，且TEM视野下新发现少量BSA纳米粒子由球形向中间凹陷的“盘状”类红细胞形貌的粒子转变。相较于PBS和含血清的PBS，BSA纳米粒子在纯水和NaCl溶液中稳定性更好。经过PLL作用后，新发现部分BSA纳米粒子可能被PLL“静电溶蚀”分解（裂解）成更小的粒子，且相较于水环境，这种现象在NaCl溶液中更易发生。 3、层层组装M适体包被的载Dox的BSA纳米粒子用于靶向肿瘤细胞 不同于常规化学修饰，此处采用适体作为新型肿瘤靶向分子，通过物理静电吸附，层层组装制备了M适体包被的载Dox的BSA纳米粒子(M-BSA-Dox)，考察了其载药、体外释放和靶向肿瘤细胞的作用。结果发现:BSA纳米粒子对M适体和Dox的载药量及包封率均较高。BSA纳米粒子在酸性环境中较弱碱性环境释药更快，但均可在24～48 h达到峰值释放，因而也提示其有一定的缓释作用。细胞毒试验和激光共聚焦显微镜结果显示，空白BSA纳米粒子包被M适体前后均未见明显的细胞毒性;相比BSA-Dox纳米粒子和正常CHO细胞，M-BSA-Dox纳米粒子对阳性高表达MUC1粘蛋白的MCF7靶细胞有明显的选择性细胞毒作用和胞吞增加现象，提示适体修饰的白蛋白纳米粒子能选择性靶向并杀伤肿瘤细胞。 4、自组装M适体修饰的载Dox的DNA四面体纳米结构用于靶向肿瘤细胞 与以往纳米载药系统不同，此处通过人工合理设计寡核苷酸链，在“淬火”条件下制备了新型的适体靶向肿瘤的DNA自组装体——DNA四面体纳米结构(Td)和修饰有4个M适体靶向分子的DNA四面体(M-Td)，进而载药Dox分别形成Td-Dox和M-Td-Dox，随后评价了其载药及体外靶向肿瘤细胞的作用。结果发现:Td和M-Td平均粒径分别为6.5nm和8.3nm，Zeta电位分别为-6.6mV和-8.2mV，产率分别为73％和63％，且其对Dox的载药量及包封率也较高。细胞毒试验和激光共聚焦显微镜结果显示，相比Td-Dox和正常CHO细胞，M-Td-Dox对阳性高表达MUC1粘蛋白的MCF7靶细胞有明显的选择性细胞毒作用和胞吞增加现象，表明适体修饰的DNA自组装体能选择性靶向肿瘤细胞，因而是抗肿瘤药物靶向递送的良好载体。 总之，本研究优化出的去溶剂法能在短时间内制备良好白蛋白纳米粒子，这为以白蛋白纳米粒子为基础的广泛研究及应用奠定了良好的方法学基础。本研究也证明适体修饰的白蛋白纳米粒子和DNA自组装体能选择性地靶向肿瘤细胞，为将这两种载体用于肿瘤诊断和靶向治疗提供了实验依据，也为进一步以其为新型纳米载体平台拓展其多方面的应用奠定基础。