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天麻来源于兰科(Orchidaceae)植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎,具有息风止痉、平肝潜阳、祛风通络之功效,用于肝风内动,肝阳上亢,中风不遂、风湿痹痛等症。现代研究认为天麻具有预防老年痴呆以及心血管疾病等作用。近年来,随着“中药保健热”的兴起,天麻作为保健品食用受到广泛青睐。目前,天麻饮片有天麻片、冻干天麻片、天麻粉等。全天麻胶囊为天麻药材粉末直接灌装而成,用量较大,本研究将其作为“天麻饮片”类一起研究。由于各种规格的“天麻饮片”的加工工艺复杂,导致天麻药材的原有外观性状和特征性气味减弱或直接消失,其真伪优劣难于鉴别。并且,在2015年版《中国药典》中,仅以天麻素和对羟基苯甲醇之和作为天麻片质量评价的指标,难于有效评价其质量。为此,本文针对“天麻饮片”的质量评价进行了以下四个方面的研究:第一、“天麻饮片”HPLC指纹图谱的建立及质量评价;从不同生产企业收集了42份天麻片、冻干天麻片、天麻粉、全天麻胶囊等不同性状的“天麻饮片”样品,应用HPLC-DAD-MS技术,测定、比较了这些样品的HPLC图谱,确定了11个色谱峰为这些“天麻饮片”HPLC指纹图谱的共有峰;根据对照品保留时间、在线UV光谱图以及MS数据,鉴定了6个主要色谱峰,分别天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、B、C和E。由于这4种规格的“天麻饮片”的指纹图谱上均有这11个共有峰和6个特征峰,并且特征峰的强度及指纹图谱的整体峰形相近,平均相似度分别为0.925,0.967,0.981,0.968。因此,根据这些HPLC指纹图谱不能鉴别这4种规格的“天麻饮片”。但是,根据天麻片和天麻粉HPLC指纹图谱中特征峰数目和整体峰形可准确地鉴别各自的正品与伪品和掺伪品,并能判断天麻中成药中是否含天麻。由此可见,虽然所建立的天麻HPLC指纹图谱不能鉴别这4种规格的“天麻饮片”,但可准确鉴别“天麻饮片”的真伪和优劣。第二、一测多评法测定不同“天麻饮片”中药效成分的含量;通过优化供试品的制备方法,建立了一测多评测定“天麻饮片”中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、B、C和E共6种药效成分含量的方法,测定了42份不同规格“天麻饮片”药效成分的含量,评价它们的的质量。并采用Pearson相关性分析,研究各成分之间的相关性。结果表明,(1)以天麻素为内参物,对羟基苯甲醇、巴利森苷A、B、C和E与天麻素的相对校正因子(f)分别为2.113、0.879、0.814、0.801、0.654,且各校正因子的重现性良好(RSD<4.217%);一测多评法与外标法的测定结果一致(相关系数在0.995-1.000)。(2)这4种规格“天麻饮片”中6种成分含量之和依次为:天麻粉(3.214%,n=11)>冻干天麻片(3.059%,n=3)>全天麻胶囊(2.808%,n=13)>天麻片(2.366%,n=16)。(3)Pearson相关系数分析的结果表明,这6种药效成分的含量在两种成分之间呈现正或负的相关性。天麻素与药典标准之间的相关系数为0.993(P=0.001),说明天麻素与天麻素和对羟基苯甲醇之和成正相关,但与对羟基苯甲醇、巴利森苷A,巴利森苷B呈显著的负相关(P<0.01),说明天麻素含量越高,巴利森苷A和巴利森苷B的含量越低。第三、天麻片和冻干天麻片的加工工艺研究:(1)天麻片的加工比较了以天麻药材和新鲜天麻为原料加工的两种方法。根据外观性状和上述6种药效成分的含量高低确定天麻片的加工工艺。以天麻药材为原料,考察了天麻经冷水浸软、冷水润软、70℃热水浸泡4h、70℃热水浸泡2h蒸软、润2h蒸软、直接蒸制7-8成软、直接蒸制全软后,切制加工而成的天麻片的质量。发现在这些不同软化方法加工而成的天麻片中,这6种药效成分的含量不同,依次为冷水润软(3.974%)>70℃热水浸泡4h(3.346%)>70℃热水浸泡2h蒸软(3.158%)>直接蒸至7-8成软(2.701%)>冷水浸软(2.278%)>直接蒸至全软(2.257%)。结合天麻片的外观性状,以70℃热水浸泡2h蒸软加工为佳。以新鲜天麻为原料,考察了蒸制后切片、切片蒸制和去皮后蒸制切片三种方法而成的天麻片。这6种药效成分的含量之和分别依次为蒸制切片(3.56%)>切片蒸制(3.44%)>去皮蒸制切片(1.83%);结合其外观性状,蒸制后切片的加工工艺最佳。同时,还考察了不同烘干温度对天麻加工工艺的影响。(2)冻干天麻片的加工比较了鲜天麻先切片后冷冻干燥和先蒸制后切片冷冻干燥两种方法。结果表明,这6种药效成分的含量之和为先蒸制后切片冷冻干燥(5.32%)高于先切片后冷冻干燥(2.54%)的冻干天麻片。并且,前者的外观性状优于后者。故鲜天麻先蒸制后切片冻干的工艺为佳。第四、天麻质量标志物的研究;天麻含天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A,B,C,E等多种药效成分,为了选择在体内发挥药效的成分作为天麻质量评价的标志物,在天麻粉中分别加入胃蛋白酶和胰蛋白酶在37℃提取,在不同时间段测定天麻粉中6种药效成分的含量,建立了人工胃肠液体外水解模型,考察了天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A,B,C,E在消化道转化的动态变化规律。结果表明,这6种药效成分在消化道的胃液中无转化。在小肠中主要以水解产物如天麻素存在;天麻素的含量随着停留时间的延长而逐渐增加,10 h时含量最高,之后不再增加;巴利森苷C的含量在0~12 h内不断增加,12 h时达到最大值(0.453%);与此同时,巴利森苷A的含量在停留12 h后降到最低值,为最高值的58.7%。由此可见,天麻素和巴利森苷C是在体内发挥药效的主要成分,可作为天麻质量评价的标志物。此外,对天麻质量评价的研究进展进行了综述,为“天麻饮片”的质量控制、临床应用和相关产品的开发提供依据。