【摘 要】
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呕吐毒素和T-2毒素是不同类型镰刀菌毒素的典型代表,它们广泛的存在于小麦、大麦、玉米等谷物之中,是污染粮食的主要真菌性毒素。真菌毒素存在的广泛性、剧烈的影响以及潜在的
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呕吐毒素和T-2毒素是不同类型镰刀菌毒素的典型代表,它们广泛的存在于小麦、大麦、玉米等谷物之中,是污染粮食的主要真菌性毒素。真菌毒素存在的广泛性、剧烈的影响以及潜在的致癌性使得对于可能存在污染的主要食品和相关产品必须制定最大允许限量的强制标准。因此,目前我国急需建立一个快速、准确、灵敏的毒素检测方法。本课题主要采用目前国际先进的免疫亲和技术等前处理手段,以HPLC法为测定方法,建立简便易行,灵敏可靠的快速、准确定性、定量谷物中呕吐毒素(DON)和T-2毒素的高效液相色谱检测和质谱确证方法。
呕吐毒素方法为:样品用水提取,提取物通过免疫亲和柱进行富集和净化,以C18柱为分离柱,乙腈+水(1+9)混合溶剂为流动相进行高效液相色谱分离和检测,利用大气压化学电离质谱(APCI)进行阳性结果的鉴定和确认。在小麦、大麦等样品中,本方法在0.1-10ug/g添加范围内的回收率大于80%,相对标准偏差小于0.03,检出限为0.1ug/g。
T-2毒素方法为:样品用甲醇+水(8+2)混合溶剂进行提取,提取物通过免疫亲和柱进行净化,净化后的毒素与1-AN和DMAP进行衍生化反应,以C18柱为分离柱,乙腈+水(8+2)混合溶剂为流动相,荧光检测器(激发波长381nm,发射波长470nm)进行高效液相色谱分离和检测,利用大气压化学电离质谱(APCI)进行阳性结果的鉴定和确认。在小麦、大麦、大米、玉米等样品中,本方法在0.05-1.5ug/g添加范围内的回收率大于85%,相对标准偏差小于2.2,检出限为0.005ug/g。
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