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本文分为三部分,第一部分探讨了恩诺沙星(Enrofloxacin)对红笛鲷[Humpheadsnapper(Lutjanus sanguineus Cuvier)]的安全使用浓度。第二部分研究了恩诺沙星以腹腔注射及拌料投喂两种不同给药方式对红笛鲷免疫功能的影响,第三部研究了常用的水产抗菌药物氟苯尼考(Florfenicol)腹腔注射给药对红笛鲷免疫指标的影响。
所得实验结果为提高养殖鱼类的免疫功能和防病抗病能力、合理利用抗菌药物、开发更为高效安全的抗菌药物提供一定的理论依据,特别是对那些免疫功能已受抑制的水产动物在新药选择上很有参考价值。
恩诺沙星毒性试验1、通过预备实验结果,将恩诺沙星分别按系列稀释设置7个浓度组和1个空白对照组,试验在自然海域中进行,实验过程中不投喂,在24h、48h、和96h分别记录实验鱼的死亡数和存活数,研究表明恩诺沙星对红笛鲷的24hLC50为795.18mg/kg、48hLC50为715.37mg/kg、96hLC50为675.54mg/kg,95%可信区间分别为690.26~901.30mg/kg、607.06~824.56mg/kg、565.61~786.16mg/kg。按照1995年制订的《农药登记毒理学试验方法》国家标准中的规定<[2]>,恩诺沙星对红笛鲷的毒性属于低毒。根据安全浓度经验公式(Sc=0.1×96hLC50)计算恩诺沙星对红笛鲷安全浓度为67.56mg/kg。
恩诺沙星对红笛鲷免疫功能的影响本章分两种给药方式探讨恩诺沙星对红笛鲷免疫功能的影响。注射组分别用0、20、40、80mg/kg鱼体重的恩诺沙星腹腔注射红笛鲷,每周一次,共注射五次后于最后一次注射结束的第二天尾静脉取血,每周一次,共取六次检测,实验结果表明恩诺沙星对超氧化物岐化酶(SOD)影响不显著。恩诺沙星能够显著提高红笛鲷抗IgM的生成的同时促使碱性磷酸酶活力显著性升高(P<0.05),并且呈剂量效应;对溶菌酶含量影响为双向效应,中低浓度的恩诺沙星可促进溶菌酶含量的增加,但随着浓度的升高对溶菌酶含量无影响。经腹腔注射2.3*10<7>CFUs/ml溶藻弧菌攻毒后,相对生理盐水组的死亡率55%,低、中浓度组红笛鲷的死亡率分别为45%、30%,而高浓度组死亡率较高,为50%。
投喂组红笛鲷分别用0、20、40、80mg/kg鱼体重的恩诺沙星连续拌料投喂七天,停药后每周尾静脉取血,共取五次检测,探讨口服恩诺沙星对红笛鲷免疫指标及免疫功能的影响。研究表明,中低浓度组恩诺沙星能够显著提高红笛鲷抗体IgM生成的同时促进碱性磷酸酶活力显著性升高(P<0.05),并且两者含量与恩诺沙星呈剂量效应,溶菌酶含量也得到显著性升高;高浓度恩诺沙星抑制红笛鲷抗体IgM生成,但对其它免疫指标则影响不大。整个实验过程中,超氧化物岐化酶的含量均不受影响。经注射2.2*10<7> CFUs/ml溶藻弧菌攻毒后,对照组死亡率50%,低、中浓度组红笛鲷的死亡率降低,分别为40%、30%,而高浓度组死亡率45%。四个免疫指标和感染细菌试验均说明中低浓度恩诺沙星可提高红笛鲷的成活率。相比较投喂给药,注射组恩诺沙星对红笛鲷血清中的碱性磷酸酶活力及IgM抗体含量的增加影响更大。实验结果表明恩诺沙星在治疗浓度范围内可随浓度的升高而提高红笛鲷成活率,提高鱼体的免疫功能。氟苯尼考对红笛鲷免疫指标的影响分别用0、5、10、20mg/kg鱼体重的氟笨尼考溶液腹腔注射红笛鲷,每周注射一次,共注射五次后于最后一次注射结束的第二天尾静脉取血样,每周一次,共取五次检测。实验结果表明5mg/kg组氟苯尼考对所测的各项指标无影响或影响不显著。浓度10mg/kg组中氟苯尼考对SOD活力、AKP活力有显著性提高(P<0.05),但影响持续时间很短。对溶菌酶的含量、IgM的含量无显著性影响。高浓度组20mg/kg中碱性磷酸酶AKP、超氧化物歧化酶SOD活力、溶菌酶、抗体IgM均受到显著性抑制(P<0.05),但影响持续时间不同。实验结果显示中低浓度氟苯尼考对红笛鲷免疫功能无影响或影响不显著,高浓度氟苯尼考显著抑制红笛鲷各免疫指标,从而影响到鱼体自身的免疫功能。