超临界CO<,2>酶法提取苎麻纤维过程中酶解产物研究

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在常压和超临界二氧化碳(简写为SC-CO<,2>)条件下,用耐热碱性果胶酶和半纤维素酶复配后对苎麻脱胶结果进行对比研究,以揭示SC-CO<,2>条件下酶脱胶机理.对脱胶率,酶解液pH,还原总糖,单糖以及半乳糖醛酸等进行测定,对酶蛋白以及脱胶后韧皮纤维结构电镜扫描图进行分析.研究结果如下:1、常压条件酶脱胶影响因子最适组合为果胶酶浓度4﹪(对原料),半纤维素酶浓度2﹪,转速250 rpm,脱胶时间3.5 h.最高脱胶率17.22﹪.该组合因子用于SC-CO<,2>条件下酶脱胶,结果表明,SC-CO<,2>压力越高,脱胶时间越长,脱胶率越高.当SC-CO<,2>压力为8~10 MPa时,反应3 h,脱胶率达17.2﹪.SC-CO<,2>较常压条件提前0.5 h完成脱胶.复配酶脱胶能力集中在前1~2 h之间.2、脱胶0.5 h,两者的酸度都急剧下降,由起始pH9.2下降到pH7.8.3 h后常压pH保持稳定约为pH7.5,SC-CO<,2>条件下约为pH7.0.总的来看,SC-CO<,2>条件下pH下降幅度比常压要快并且到4 h时仍没有终点.3、脱胶2 h前,两种条件下还原总糖增加速度较快.2.5 h时SC-CO<,2>总糖保持稳定.3.5 h时,常压条件下也不再增长.两者的还原总糖约为763 mg.总的来看,SC-CO<,2>条件下还原总糖的增长速度要快于常压条件.4、常压和SC-CO<,2>条件下木糖变化差异不大.半乳糖变化趋势与木糖有点类似.脱胶1.5 h内,葡萄糖增加较快,且Sc-CO<,2>高于常压条件.2.5~3 h之间有一增幅,3 h后葡萄糖保持稳定.SC-CO<,2>条件下葡萄糖的增长速度比常压条件下快.5、脱胶2 h内,两种脱胶条件下的半乳糖醛酸增加都很快.SC-CO<,2>条件下半乳糖醛酸的增加幅度高于常压条件,此后,比常压条件低.脱胶3 h,SC-CO<,2>条件下半乳糖醛酸不再发生变化.脱胶3.5 h,常压条件下半乳糖醛酸保持平稳.6、果胶酶中分子量为35.41 kDa的条带最粗,为主要酶蛋白成分,可能是聚半乳糖醛酸酶.另两种分子量为17.97 kDa和16.05 kDa.半纤维素酶中分子量为23.99 kOa的条带最粗,为主要酶蛋白成分.另两条主带分子量分别为56.73 kDa和46.99 kDa.7、酶脱胶后麻纤维电镜扫描结果显示,脱胶时间越长,纤维分散越好.脱胶2 h SC-CO<,2>纤维分散度要优于常压条件.脱胶3 h纤维完全分散,无并条纤维.
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