【摘 要】
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柑橘在我国园艺经济中具有重要地位。优质丰产是柑橘在国际市场上的核心竞争力。较长的童期是柑橘育种的主要障碍之一,而创制短童期的新种质一直是柑橘育种的重要目标。细胞
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柑橘在我国园艺经济中具有重要地位。优质丰产是柑橘在国际市场上的核心竞争力。较长的童期是柑橘育种的主要障碍之一,而创制短童期的新种质一直是柑橘育种的重要目标。细胞融合能实现远缘杂交,而通过将短童期资源的原生质体与其他栽培种进行原生质体融合,有望缩短育种年限。基于这一思路,本研究以短童期的山金柑为愈伤亲本、早实枳和早花柠檬为叶肉亲本进行细胞融合,旨在获得短童期的新种质,为柑橘育种和基础研究提供材料。主要结果如下:1.山金柑(愈伤亲本)+早花柠檬(叶肉亲本)融合组合:最终移栽成活18株再生植株,来自13个不同的融合事件。经流式细胞仪检测倍性,结果显示,其中12株再生植株(来自不同融合事件)为二倍体,1株为六倍体。采用SSR分子标记,对再生植株进行遗传来源鉴定,结果显示:该组合获得的12棵二倍体再生植株(来自不同融合事件)的核基因组和叶绿体基因组均来自叶肉亲本早花柠檬,同时可能发生了基因重组,出现非亲本条带;线粒体基因组均来自愈伤亲本山金柑,由此得出结论:这12棵二倍体再生植株植株均为胞质杂种,而六倍体再生植株的遗传来源有待进一步鉴定。2.山金柑(愈伤亲本)+早实枳(叶肉亲本)融合组合:采用经过改良的酶液酶解分离早实枳原生质体,原生质体融合及植株再生的方法仍采用本实验室常用方法。该组合进行多次融合实验,最终都仅得到再生愈伤。经流式细胞仪进行倍性检测,结果显示:获得的再生愈伤为二倍体与四倍体的混合愈伤。山金柑与早实枳细胞融合未能成功再生胚状体和植株可能是因为两融合亲本亲缘关系太远,融合细胞不易再生。综上所述,本实验采用体细胞杂交技术,最终得到一批二倍体胞质杂种和六倍体再生植株。这些植株将有潜力成为柑橘细胞工程基础研究的宝贵材料。
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