应用抑制素基因免疫技术诱导单胎绵羊孪生及其影响因素与作用机制研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangshaohua11
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该实验应用基因免疫、PCR、酶免疫、放射免疫等技术,研究抑制素基因免疫对绵羊抗抑制素抗体产生、基因安全、生殖内分泌、繁殖力的影响,通过比较不同免疫剂量和免疫次数的免疫效果,寻找合适的抑制素基因免疫方法,为建立提高动物繁殖力的新技术奠定基础.主要内容如下:1.抑制素基因疫苗免疫绵羊的免疫反应性研究为分析抑制素基因免疫在绵羊体内的表达和免疫反应性,该实验采用不同剂量的抑制素基因免疫质粒pCIS两次免疫绵羊,结果表明:首次免疫10天后产生了一定的抗抑制素抗体,免疫组的P/N值均高于对照组,但各组P/N的值与对照组比差异不明显(P>0.05).2.抑制素基因免疫诱导单胎绵羊孪生通过对免疫羊双羔率的统计,免疫组的双羔数、双羔率与对照组存在显著差异(p<0.05),双羔率比对照组高29.2%.免疫羊的抗体阳性率与双羔率显著相关(p<0.05),抗体阳性羊生双羔的比例为35.7%,比对照组双羔率高25.7%.由此可见抑制素基因免疫提高了绵羊的双羔率.3.抑制素基因免疫对绵羊生殖内分泌的影响为进一步了解抑制素基因免疫的作用机制和生殖毒性,该实验通过分析免疫羊血中促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)和孕酮(P)的含量,发现免疫组与对照组的FSH在免疫后变化明显,加强免疫45天时含量有显著差异(p<0.05),说明抑制素基因免疫对FSH的分泌产生了影响.4.抑制素基因免疫母羊免疫不同时期的基因分布与基因整合安全性研究:基因免疫中的基因安全试验应是免疫试验的基石.本实验根据pCIS质粒中的S基因与氨苄基因片段设计特异性引物,通过对最大剂量免疫羊、抗体阳性羊、产双羔的免疫羊及其后代的多种组织中提取的基因组作PCR扩增,旨在检测pCIS免疫是否在基因整合方面存在安全隐患.
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