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目的研究PTN(Pleiotrophin,多效生长因子)在胰腺癌细胞株Miapaca-2和Capan-1中的表达情况,利用免疫荧光技术、Q-PCR、Western blot法检测PTN mRNA和蛋白的表达,从而筛选较稳定的高表达细胞系,为后期建立小鼠原位胰腺癌模型并通过干扰原位胰腺癌中PTN蛋白的表达,进一步验证PTN与其受体结合是否激活相关信号传导通路在胰腺癌神经浸润发生中的作用提供科学依据。PTN可作为潜在的药物作用靶点,进一步对相关信号通路进行干预,抑或体外合成相应的PTN抑制剂,从而达到下调PTN或完全抑制的目的,阻止肿瘤的进一步生长及胰腺癌神经浸润的发生,为胰腺癌的早期诊断、分期及治疗寻找新途径提供科学依据。方法用DMEM及1640培养液对Miapaca-2和Capan-1细胞进行传代培养,取指数生长期细胞,利用Q-PCR法和Western blot方法检测PTN m RNA和蛋白在胰腺癌细胞株中的表达,并采用免疫荧光化学法检测PTN在胰腺癌细胞中的表达位置。结果Q-PCR结果显示,PTN mRNA在MIA Pa Ca-2细胞中表达明显较高,且与Capan-1细胞相比,MIA Pa Ca-2中PTN m RNA表达量为Capan-1的1.193倍。Western blot结果显示:目的蛋白PTN的分子量大小约为19KDa,内参GAPDH蛋白大小为36KDa。然后应用Image J软件进行半定量分析,结果发现,PTN蛋白在MIA PaCa-2和Capan-1细胞均有表达,且与Capan-1相比,MIA Pa Ca-2细胞系中PTN蛋白的表达更加明显。免疫荧光结果显示PTN的阳性表达呈红色颗粒,主要定位于胞浆,部分胞核亦可见阳性着色。随后我们将Q-PCR、Western blot、免疫荧光结果进行对比,结果表明胰腺癌细胞中PTN在mRNA及蛋白水平表达具有一致性。结论Mia Pa Ca-2细胞中PTN mRNA和蛋白均呈更高表达,主要定位于胞浆中,因此,该细胞可作为良好的研究工具,为进一步建立小鼠原位胰腺癌模型,以研究PTN与受体结合是否促进胰腺癌神经浸润的发生提供依据。