【摘 要】
：
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis,B.subtilis）是一类可产生内生孢子的革兰氏阳性细菌,属于食品安全级微生物（GRAS）。目前,已被广泛应用于食品发酵、家禽饲料、医疗卫生及农业生产中。B.subtilis发酵的酱香制品备受人们青睐。但迄今为止,对于B.subtilis发酵产酱香风味的机制研究仍然不清。实验室前期通过对中温（45℃）、中低温（37℃）条件下的B.subtilis
论文部分内容阅读
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis,B.subtilis）是一类可产生内生孢子的革兰氏阳性细菌,属于食品安全级微生物（GRAS）。目前,已被广泛应用于食品发酵、家禽饲料、医疗卫生及农业生产中。B.subtilis发酵的酱香制品备受人们青睐。但迄今为止,对于B.subtilis发酵产酱香风味的机制研究仍然不清。实验室前期通过对中温（45℃）、中低温（37℃）条件下的B.subtilis BJ3-2进行转录组测序,并对其进行差异性和富集分析,筛选出了多个显著差异表达基因。生物信息学分析和实时荧光定量PCR验证,并结合已报道文献,最终选择bglH（芳基-磷酸-β-d-葡萄糖苷酶）、sdhC（琥珀酸脱氢酶）和exuT（己糖酸酯转运蛋白）进行基因敲除并验证其产酱香的功能。主要研究内容及取得结果如下:1.利用生物信息学分析绘制了bglH、sdhC和exuT与酱香风味相关的代谢通路。2.利用荧光定量PCR对45℃和37℃培养条件下的B.subtilis BJ3-2的bglH、sdhC和exuT 3个基因表达量进行验证,以16S rRNA作为内参基因,较BJ3-237℃而言,得出:bglH、sdhC和exuT在BJ3-2 45℃的差异倍数分别增加了3.48倍,3.47倍和3.42倍,均为上调基因,其表达变化趋势与转录组测序结果一致。3.分别构建bglH、sdhC和exuT同源重组双交换敲除载体（pUC18+HLarm+cm+HRarm）。以pUC18为初始载体,酶切BJ3-2基因组上扩增的HLarm和HRarm与cm（氯霉素基因）连接,转化E.coli DH5α,经菌落PCR、质粒PCR、双酶切和测序验证,分别获得了3个基因的同源重组敲除载体,化学转化法分别转化至BJ3-2,经革兰氏染色、菌落和质粒PCR验证、双酶切和测序验证,最终获得BJ3-2ΔbglH、BJ3-2ΔsdhC和BJ3-2ΔexuT敲除菌株。4.将BJ3-2ΔbglH、BJ3-2ΔsdhC和BJ3-2ΔexuT于45℃下发酵大豆。相对于原始菌株BJ3-2,感官评定得出:BJ3-2ΔbglH和BJ3-2ΔexuT发酵的豆豉酱香味增强、粘丝增多、色泽无明显变化;BJ3-2ΔsdhC发酵的豆豉酱香味增强、粘丝和色泽均无明显变化。GC-MS检测显示,BJ3-2ΔbglH、BJ3-2ΔexuT乙偶姻含量分别降低了7.939%和5.582%,BJ3-2ΔsdhC增加了25.015%;四甲基吡嗪的含量分别增加了3.004%、0.092%和3.908%。结果表明,bglH、exuT及sdhC均影响了酱香风味的生成,传统认为酱香与豆豉褐化程度呈正相关,但本研究发现酱香风味的强弱与豆豉褐化程度无相关性。综上所述,bglH、sdhC和exuT编码的酶都能影响酱香风味的生成,分别通过磷酸戊糖途径控制糖类转为丙酮酸、三羧酸循环控制草酰乙酸反应生成丙酮酸、糖酵解控制糖类及脂肪酸转为丙酮酸,进而影响酱香风味的生成。研究通过分析豆豉挥发性风味物质发现丙酮酸是产酱香风味的重要中间代谢物,而乙偶姻及四甲基吡嗪是影响酱香风味的关键物质。研究可为酱香风味产生机制研究奠定了一定的理论基础。
其他文献
在我国的经济体系中,小微企业对于促进我国的经济发展,维持社会稳定起到了重要作用,但是随着国际形势的加剧,对于小微企业而言,更是造成其经营的困难。因此,很多商业银行已经在积极探索小微企业的信贷业务,逐渐使得小微企业成为各大商业银行信贷业务必争之地,同业也进一步加剧了小微企业信贷业务的市场竞争。由此可见,以小微企业为突破口,为其提供信贷业务的同时,加快对其资金业务的转移,不仅仅解决了以往小微企业信贷难
大分子受限在生命体系中普遍存在,例如,作为遗传信息载体的DNA受限于细胞核内,受限空间中的DNA分子拓扑结构转变对DNA分子转录过程有重要影响。因此,研究球受限下DNA分子构象转变具有重要意义。为深入了解这一生物物理过程,论文主要利用Monte Carlo模拟方法,分别基于蠕虫链和蠕虫棒两种模型研究球受限空间对环状DNA分子构象及其拓扑结构的影响。基于蠕虫链模型,采用Monte Carlo模拟方法
持续性的温室气体排放导致的全球气候变暖,会对人类社会和生态系统造成破坏性风险。现阶段,加大控制碳排放的力度,抵御气候变暖引发的灾难性后果已成为人类社会的共识。作为全世界碳排放量最大的国家,中国有义务也有必要接受国际协定的倡议,在保持经济稳定增长的同时,努力减少二氧化碳排放量。尤其在新一届“气候雄心峰会”上作出“争取在2030年前达到碳排放峰值,2060年前实现碳中和”的郑重承诺后,中国将面临更加巨
控制量子点异质结表/界面的荧光,它不仅是了解异质结界面物理化学性质的重要途径,也是提高光诱导载流子利用效率的有利途径,决定了量子点异质结的功率转换效率（PCE）,全无机CsPbBr3量子点（QDs）被认为是一种理想的敏化材料,可以与其他光敏材料结合提高太阳能电池的PCE。MoS2在载流子迁移方面具有许多独特的优势和突出的灵活性,但它对光的吸收能力较弱,限制了它在光发射器件、光伏器件和光电探测器中的
在当前的全球生态环境和能源经济议题中,能源管理是关注的焦点。通过人为主动调控从而减少能源消耗的有效方式之一是NILM（Non-Intrusive Load Monitoring,非侵入式负荷监测）,其目标是将家庭总用电量的智能电表读数分解为该家庭每一个单独的用电器功耗曲线（设备激活）。现今,机器学习方法被广泛用于解决NILM问题,但是它们需要大量带标记的单个用电器耗电量（设备签名）,而这些数据并不
群聊消息的数据类型繁多,文本内容的特征向量又呈现高维、稀疏的特点,主流聚类方法难以取得很好的效果;不同的群聊话题容易交叉并行,现有的分割、提取话题的技术还存在较大提升空间;在群聊舆情监测方面,如何提高敏感内容识别的准确性并保证预警信息产生的及时性是重要课题。为解决上述三个问题,需使用计算机技术对群聊数据展开舆情监测。本论文结合群聊特征,基于文本挖掘技术,以实现舆情监测为目的,提出群聊话题序列的概念
2008年以来,美国对华政策日益保守,成为这一时期中美关系下行的重要原因。本文以国内政治视角解释美国对华政策的转变,为理解中美关系乃至当今国际关系提供更加积极的角度。新古典现实主义理论分别将国际体系、国内政治与外交政策作为自变量、中介变量和因变量,强调国内政治因素对美国对华政策的重要影响。在此基础上,综合运用定性分析法、层次分析法和外交政策分析法,将中介变量具体划分为战略文化、政治结构与国家—社会
绿色金融是推动绿色经济发展的金融制度安排,通过市场化的传导机制,绿色金融能够引导资本投向绿色产业、绿色企业。本文从顶层设计及绿色金融产品角度分析了我国绿色金融发展现状,发现我国绿色金融仍面临着产品创新不足、金融机构参与度不高、相关政策的顶层设计不足等问题。应通过完善法律体系、出台相关的鼓励性政策积极推动绿色金融的发展。另一方面,应发挥互联网金融的推动作用,创新绿色金融产品。
杜仲是我国独有的经济树种,其重要产物为杜仲胶,杜仲胶是一种反式聚异戊二烯,其合成途径研究较少,特别对橡胶颗粒的生物发生和稳定性至关重要的小橡胶颗粒蛋白（SRPP）家族蛋白的研究更是鲜有报道。因此本研究通过克隆SRPP基因启动子,分析SRPP基因启动子顺式作用元件,进一步分析SRPP基因的表达模式;通过筛选与SRPP基因启动子区域互作的转录因子,使用生物信息学方式分析转录因子的功能,揭示转录因子调控
茶树（Camellia sinensis（L.）O.Kuntze）属山茶科,是一种较为原始的种群植物,起源于中国的西南地区,在由起源地向其他地区传播的过程中,发生从形态学水平到分子水平的一系列演化。近年来,各种新技术、新方法被广泛应用于研究茶树遗传演化关系,并取得一定的进展。我们从基因组层面,结合原产地茶树特征和特性,探讨贵州省古茶树起源及主要野生资源亲缘关系。本文以90份贵州省古茶树和30份云南