论文部分内容阅读
近年来,表面增强拉曼光谱(Surface Enhanced Raman Spectroscopy, SERS)因其具有非侵入性、非破坏性、高灵敏性等特点而被广泛应用于生物研究领域。胶体金免疫层析法(Immunochromatographic Assay, ICA)作为一种简单快速、低成本、适合现场快速筛选的免疫分析的手段,已成为食品安全中的重要检测手段。但目前发展的表面拉曼增强免疫分析方法存在操作复杂(基底的制备、处理)、重现性低(拉曼信号不均匀)、成本高(仪器设备价格昂贵)等不足。在此基础上,我们提出了一种使用便携式表面增强拉曼光谱仪的简便、快速、低成本、超灵敏的表面增强拉曼光谱免疫层析技术(SERS-ICA)检测盐酸克伦特罗,结合了SERS的高灵敏性与ICA快速简便性,以硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane, NC)为基底,并通过简单易行的种子生长法合成了粒径均匀、分散性好、核壳结构的Au@Ag复合纳米粒子作为拉曼探针,对其性质,形貌,拉曼增强活性进行了表征,通过条件的优化,取得到优异的检测结果。 具体内容如下:我们成功制备了35nm的金纳米粒子,拉曼标记物对巯基苯甲酸(MBA)通过Au-S键与金纳米粒子相连,并通过还原硝酸银制备了核壳夹心结构的、高拉曼增强信号的AuMBA@Ag探针,当银壳层厚度为5nm时,Au@Ag复合纳米粒子的拉曼增强效果最好。在 AuMBA@Ag探针表面连上抗体,应用便携式表面增强拉曼光谱仪和课题组制备的盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CL)多克隆抗体和包被抗原,测定检测线(T线)上拉曼标记物(MBA)的拉曼信号对CL进行定量分析。灵敏度为0.02 ng mL-1,检出限为0.24 pg mL-1,T线上拉曼信号的RSD在4.3-8.7%,并且评价了方法的重现性和特异性等。 我们将SERS和ICA有机结合,建立的新型SERS-ICA法不仅成本低、易操作、简便、快捷检测盐酸克伦特罗,我们期望建立一系列不同拉曼增强探针(金纳米棒、金纳米花等)的SERS-ICA法,并应用到其它目标分析物的检测。