TNF-α抑制剂对重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡及Caspase-3表达和肺损伤的影响

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目的:本实验通过对大鼠重症急性胰腺炎合并肺损伤模型的建立,使用TNF-α抑制剂对其进行干预,比较假手术组、SAP组和干预组三组各个评价指标的差异。从而评价TNF-α抑制剂对大鼠重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡及Caspase-3表达和肺损伤的影响。方法:血清淀粉酶:经CX9全自动生化分析仪检测血淀粉酶;血清TNF-α:采用双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测;RT-PCR实验:检测ET-1mRNA和ICAM-1mRNA在肺组织中的表达;Caspase-3、ET-1、NF-κB蛋白表达检测:采用SP两步法染色,检测肺组织中ET-1、NF-κB的表达和胰腺组织中Caspase-3的表达;凋亡细胞检测:TUNEL法检测胰腺组织和肺组织的细胞凋亡,计算100个胰腺细胞中阳性细胞所占的百分比,即为凋亡指数;肺组织湿/干比:开胸后即取出肺右叶用电子天平称湿重后置于恒温烤箱至恒重,计算湿/干比;胰腺组织病理学观察:胰腺组织进行HE染色,按照Gross评分原则对其评分。结果:成功构建了重症急性胰腺炎大鼠合并肺损伤的模型;对于血清淀粉酶和TNF-α,假手术组明显低于SAP组和干预组;SAP组与干预组比较则高于干预组;假手术组胰腺中Caspase-3蛋白未见有明显的表达,干预组胰腺中Caspase-3蛋白的表达高于SAP组;假手术组的胰腺细胞和肺组织细胞未见有明显的凋亡;SAP组胰腺细胞和肺组织细胞的凋亡低于干预组;ET-1、NF-κB和ICAM-1在假手术组肺组织中的表达不明显,在SAP组中其表达水平明显高于干预组;假手术组肺组织湿/干比明显低于干预组和SAP组,SAP组肺组织湿/干比则高于干预组;假手术组胰腺组织坏死不明显,SAP组胰腺坏死程度高于干预组。结论:TNF-α抑制剂能显著降低重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织和肺组织的炎症反应,降低血清淀粉酶和TNF-α,增加胰腺组织Caspase-3蛋白的表达,降低肺组织NF-κB、ET-1和ICAM-1的表达,降低肺组织的湿干比值,增加细胞凋亡,改善肺微循环,减轻胰腺组织炎症损伤。
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