中华绒螯蟹血淋巴细胞吞噬作用参与免疫致敏的机制探究

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在第二次嗜水气单胞菌刺激后第0.5天到第7天,中华绒螯蟹血淋巴细胞对2微米凝胶微球的吞噬率均显著提高(p<0.05),其中,在第二次刺激第12小时后,血淋巴细胞的吞噬率达到最高,为对照组(一次免疫注射生理盐水,第二次免疫注射嗜水气单胞菌,下同)的1.67倍(p<0.05)。另外,在第二次免疫刺激12小时后,中华绒螯蟹血淋巴细胞对1微米凝胶微球的吞噬率显著升高,为对照组的4.08倍(p<0.01);且吞噬2个以上凝胶微球的血淋巴细胞明显多,为对照组的21.54倍(p<0.01);血淋巴细胞对嗜水气单胞菌的吞噬率也显著提高,为对照组的1.46倍(p<0.01)。上述结果说明,第二次免疫刺激后中华绒螯蟹血淋巴细胞有更强的吞噬活性与吞噬能力。
  在第二次嗜水气单胞菌刺激12小时后,中华绒螯蟹血淋巴细胞颗粒细胞占比显著降低(p<0.05),与对照组相比减少了2.52%,透明细胞占比显著升高(p<0.05),与对照组相比升高了2.66%;在第二次嗜水气单胞菌刺激1天后,中华绒螯蟹血淋巴细胞线粒体含量显著升高(p<0.05),为对照组的1.30倍;在第二次嗜水气单胞菌刺激12小时后,中华绒螯蟹血淋巴细胞溶酶体含量也显著升高(p<0.05),为对照组的1.48倍;在第二次嗜水气单胞菌刺激后,中华绒螯蟹血淋巴细胞ROS含量与对照组相比没有显著差异(p>0.05)。这些结果提示着血淋巴细胞吞噬作用的增强可能依赖于透明细胞的增多与血淋巴细胞溶酶体与线粒体的增多。
  在第二次嗜水气单胞菌刺激12小时后,血淋巴细胞内吞噬作用相关的基因如EsDscam,EsB52,EsRab3,EsC1qR基因的mRNA表达量显著升高(p<0.05),分别为对照组的1.10倍,1.18倍,1.70倍和1.63倍;但EsGal,EsRab1,EsLecA,EscytSOD基因的表达量对照组相比没有显著差异(p>0.05)。这些结果说明一部分吞噬作用相关基因能够通过提高mRNA表达量的方式参与血淋巴细胞吞噬作用的增强。
  综上所述,中华绒螯蟹血淋巴细胞的吞噬作用在第二次嗜水气单胞菌刺激后增强,推测其增强可能依赖于透明细胞的增多,溶酶体、线粒体的增多,以及吞噬作用相关基因mRNA的升高表达。本研究初步揭示了中华绒螯蟹免疫致敏过程中血淋巴细胞吞噬作用机制,为无脊椎动物的适应性免疫和适应性免疫的进化历程研究提供重要参考。
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