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microRNA(miRNA)是一类广泛分布于真核生物的非编码小分子单链RNA，通过与靶mRNA碱基对特异结合，引起靶mRNA降解或翻译抑制，调控基因转录后的表达。近年来研究揭示miRNA-218是一个典型的多功能基因，是潜在的致癌基因或抑癌基因，由其下游基因介导参与多种生理病理过程，在多种肿瘤的发生、发展中具有重要作用。因此，miRNA的研究对于揭示肿瘤基因的表达、肿瘤疾病的治疗以及预防具有重要意义。本研究主要探讨miRNA-218在喉癌组织中表达是否有差异，并分析异常表达与年龄、性别、吸烟史、TNM分期和临床分级的相关性，进一步研究miRNA-218对喉癌细胞增殖及凋亡能力的影响。
材料与方法
本研究采用荧光实时定量RT-PCR的方法，检测40例喉癌原发灶组织及其相应的癌旁正常喉黏膜组织中miRNA-218表达水平;以人喉鳞癌Hep2细胞系为研究对象，将Hep2细胞分为转染miR-218模拟物(miR-218 mimics)的实验组，未转染的Hep2细胞为对照组;应用荧光实时定量RT-PCR检测两组Hep2细胞中miR-218的含量;采用MTT、流式细胞术实验方法观察miR-218对Hep2细胞增殖及凋亡水平的影响。
结果：
1、荧光实时定量RT-PCR结果显示:喉癌组织及其相应的癌旁正常喉黏膜组织中miR-218表达比值分别为:0.76±0.31、0.39±0.11，有统计学意义(P＜0.05)。MiR-218表达水平的差异与患者吸烟史的关系有统计学意义(P＜0.05)，而与年龄、性别、TNM分期与临床分级的关系无统计学意义(P＞0.05)。
2、瞬时转染Hep2细胞后，荧光实时定量RT-PCR结果显示:miR-218在未转染的喉癌Hep2细胞（对照组）和转染miR-218模拟物的喉癌Hep2细胞（实验组）的表达比值分别为:0.41±0.06、1.15±0.23，有统计学意义(P＜0.05)。
3、MTT检测细胞增殖情况，结果显示:实验组及对照组Hep2细胞在24h、48h、72h和96h时的相对吸光度值分别为0.39±0.05、0.48±0.02、0.71±0.15、0.89±0.14和0.37±0.06、0.53±0.04、0.69±0.14、0.98±0.22。自转染后48小时，各时间点实验组Hep2细胞的存活数与对照组相比没有明显差异，无统计学意义(P＞0.05)。
4、流式细胞术检测细胞凋亡情况，结果显示:实验组及对照组Hep2细胞的凋亡率分别为:11.06％±0.14％、11.16％±0.08％，自转染后48小时，实验组与对照组Hep2细胞的凋亡率没有明显差异，无统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1、喉癌组织中miR-218在转录水平的表达有显著差异，miR-218表达水平的异常与患者吸烟史有关，提示其与喉癌的发生发展有密切联系。
2、miR-218对人喉鳞癌Hep2细胞系的增殖及凋亡能力无明显影响。