【摘 要】
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本文对重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)的表达、提纯及其在小鼠体内的抗氧化活性进行了研究。 通过研究rhMn-SOD的质粒稳定性及rhMn-SOD酶蛋白在各种应用条件下的稳定性
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本文对重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)的表达、提纯及其在小鼠体内的抗氧化活性进行了研究。
通过研究rhMn-SOD的质粒稳定性及rhMn-SOD酶蛋白在各种应用条件下的稳定性，优化了发酵及提纯条件。基本确定了rhMn-SOD进行提取和分离的适合条件：pH8.0缓冲液，菌体沉淀先冻存三天，解冻后超声破碎；热变性条件为75℃保温10min；粗酶液经过离心沉淀、透析脱盐、CM-52和DE-52离子交换层析后，rhMn-SOD的比活达到4568U/mg.prot，纯度达到电泳纯。
通过检测肝、脑匀浆及红细胞(RBC)溶血液的丙二醛(MDA)、谷甘胱肽过氧化物酶(GSH-Px)、及总超氧化物歧化酶(SOD)等指标观察并比较了rhMn-SOD对小鼠经A波紫外线(UV-A)辐射所致氧化应激损伤的的保护作用。结果显示，UV-A模型组的肝脑匀浆的三个抗氧化指标与空白对照组比较具有显著性差异(P＜0.01)，rhMn-SOD预防性给药组肝脏各指标与UV-A模型组相比均有显著性差异(P＜0.05)，并有剂量依赖性关系，但各组的红细胞指标均无显著性差异(P＞0.05)。提示该UV-A辐射模型主要造成肝、脑氧化损伤，对RBC无明显影响；rhMn-SOD对肝脏具有较好的保护作用。
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