小鼠腭胚突上皮细胞表面初级纤毛形态结构的初步研究

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目的:以C57BL/6J胎鼠为模型,运用免疫荧光及电子显微镜技术,观察小鼠腭胚突上皮细胞初级纤毛等超微结构,为探索小鼠腭胚突发育过程中,初级纤毛与小鼠腭发育过程中关键信号因子传导之间的关系奠定一定基础。方法:1.收集C57BL/6J孕鼠8只,ED12.5、13.5、14.5、15.5各2只,处死并获取小鼠胚胎,制作扫描电镜标本,并用扫描电镜观察小鼠腭胚突上皮细胞表面初级纤毛等超微结构。2.另收集孕鼠8只,ED12.5、13.5、14.5、15.5各2只,处死并获取小鼠胚胎,制作透射电镜标本,进行透射电镜观察并确定小鼠腭胚突上皮细胞表面初级纤毛结构。3.另收集孕鼠8只,ED12.5、13.5、14.5、15.5各2只,处死并获取小鼠胚胎,制作石蜡切片,利用免疫荧光及激光共聚焦显微镜,观察并确定小鼠腭胚突上皮细胞表面的初级纤毛结构。结果:1.扫描电镜结果显示,ED12.5、13.5、14.5小鼠腭胚突上皮细胞形状均匀等大,部分细胞表面可见纤毛突出于细胞表面,纤毛膜完整光滑,除此之外,上皮细胞表面可观察到大量指状和丝状伪足;ED15.5小鼠腭胚突基本融合,上皮细胞形状均匀等大,未见纤毛突出于上皮细胞表面,上皮细胞表面丝状伪足数量与ED14.5相比减少。2.透射电镜结果显示,可见ED12.5、13.5、14.5的小鼠腭胚突上皮细胞有长短不一的初级纤毛结构,纤毛基部的轴丝、纤毛膜及纤毛基质清晰可见,胞质内其他细胞器清晰可见。其中ED12.5小鼠腭胚突细胞初级纤毛的9+0型微管结构清晰可见,除此之外,上皮细胞表面可见大量丝状细胞伪足;而ED15.5的小鼠腭胚突已基本融合,腭板口腔侧上皮细胞表面未见纤毛突出于细胞表面,胞质内其他细胞器清晰可见及部分细胞表面可见丝状细胞伪足。3.激光共聚焦显微镜结果显示,大多初级纤毛定位于ED12.5、13.5、14.5小鼠腭中嵴上皮细胞,而ED15.5的小鼠腭胚突已基本融合,未检测到初级纤毛。结论:本实验证实了特定孕期小鼠腭胚突上皮细胞表面存在初级纤毛,且形态、结构与其他组织细胞的初级纤毛差别不大。随着小鼠腭胚突的融合,小鼠腭胚突上皮细胞表面初级纤毛消失,说明初级纤毛与小鼠腭胚突融合之间有一定关联,为进一步研究初级纤毛与小鼠腭胚突发育期间关键信号之间的关系奠定基础。
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