TaNHX<,2>基因表达载体、Na<'+>/H<'+>反向运转蛋白RNAi载体构建及功能分析

• 作 者: 原江锋
• 机 构: 陕西师范大学
• 出 处: 陕西师范大学
• 发表日期: 2005年期
• 关键词: 反向运转蛋白 植物表达载体 盐胁迫 RNA干涉

本课题以小麦中TaNHX2为研究对象，构建了含有TaNHX2基因的植物表达载体；构建Na+/H+反向运转蛋白基因的RNA干涉表达载体；采用花粉管通道法成功的获得了转基因拟南芥，并进行了相关的分子生物学鉴定及生理验证，为植物耐逆研究积累相关资料。以植物双元载体pBIN438为基本元件，构建含TaNHX2基因的植物表达载体，利用花粉管通道法将TaNHX2基因导入拟南芥，并获得转基因植株，通过实验说明过表达TaNHX2基因提高了转基因拟南芥的耐逆能力；克隆得到拟南芥Na+/H+反向运转蛋白基因的部分片段，构建了抑制Na+/H+反向运转蛋白基因的RNA干涉表达载体，利用花粉管通道法将RNAi载体导入拟南芥，并获得转基因植株，实验说明Na+/H+反向运转蛋白基因的RNAi载体使转基因拟南芥的耐盐和耐旱能力下降。