【摘 要】
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将GFP的改良基因:GFPmut1、GFPmut2、GFPmut3插入到CaMV35S启动子下游获得了3个植物双元表达载体:pBI-GFPmut1、GFPmut2、GFPmut3;再将已有的含35S35SAMV+coxⅣ+mgfp4的植物
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将GFP的改良基因:GFPmut1、GFPmut2、GFPmut3插入到CaMV35S启动子下游获得了3个植物双元表达载体:pBI-GFPmut1、GFPmut2、GFPmut3;再将已有的含35S35SAMV+coxⅣ+mgfp4的植物双元表达载体pRHK4和含35S+mgfp5植物双元表达载体pCAMBIA1302组合成pCAMBIA13024(35S35SAMV+coxⅣ+mgfp4+35S+mgfp5).将上述6个载体及pRHK2通过农杆菌介寻分别转化烟草及三种花卉:矮牵牛、花叶芋、大岩桐、在获得的pBI-GFPmut1、GFPmut2、GFPmut3、mgfp4转化的花叶芋、大岩桐、烟草、矮牵牛中通过荧光显微镜和激光共聚焦扫描仪均检测到绿色荧光;在烟草、矮牵牛能在植株各部分和各个发育期持续地检测到gfp相关的绿色荧光,说明gfp能稳定表达,少数几棵转基因烟草在手提长波此外灯照射下其叶脉发出肉眼能观察到的荧光的.此外观察到在烟草、矮牵牛中GFP能在定位序列coxⅣ的指导下可能是定位到线粒体上.通过对有绿色荧光的烟草、矮牵牛进行dot blot、southern blot分析,都获得阳性杂交结果,证实gfp基因已整合到植物基因组中并与绿色荧光观察结果一致.
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