论文部分内容阅读
手性农药以外消旋体形式在农林业中被大量施用,而不同的对映体对靶标生物可能存在完全不同的毒理效应,因此从对映体层面研究手性农药对环境生物的影响尤为重要。本课题通过叶绿素荧光参数、藻蛋白和藻胆蛋白分析乙草胺(ACT)对水华微囊藻光合作用的影响。再用高效液相色谱法对ACT进行对映体的拆分与制备,从对映体层面来研究ACT对水华微囊藻的群体现象、超微结构、氧化应激、藻毒素产生和释放的影响,探讨手性农药ACT对水华微囊藻的对映体选择性毒性效应,得出的如下几点结论:(1)通过对水华微囊藻光合生理的实验可知:在低浓度(0.01~1 mg/L)ACT胁迫下,光合作用不受影响;而在高浓度(10和50 mg/L)ACT胁迫下,Fv/Fm、Y(II)、快速光响应曲线等参数显著降低(P<0.05),光合作用受到抑制。ACT对藻蛋白和藻胆蛋白也有抑制作用。(2)利用高效液相色谱法对ACT进行对映体的拆分与制备,达到基线分离,前峰为αR-ACT,后峰为αS-ACT。(3)通过藻细胞的群体现象和超微结构实验可知:随着ACT及其对映体浓度的增加,水华微囊藻会出现团聚,群体现象效应更为明显;ACT及其对映体也会对水华微囊藻超微结构造成不同程度的破坏,如细胞变形、分裂不对称、细胞壁被破坏等。ACT对水华微囊藻群体现象和超微结构的影响大小为:αS-ACT>Rac-ACT>αR-ACT,且具有对映体选择性差异。(4)通过对水华微囊藻的氧化应激的实验可知:αS-ACT组在0.1 mg/L和1 mg/L浓度下,SOD活性和MDA含量降低,GSH含量先降低后回升;而αR-ACT各浓度组对水华微囊藻的氧化应激无影响。ACT及其对映体对水华微囊藻氧化应激的影响大小为:αS-ACT>Rac-ACT>αR-ACT,且具有对映体选择性差异。(5)通过微囊藻毒素LR(MC-LR)酶联免疫分析法测定藻外、藻内和总MC-LR的含量,可知ACT促进了水华微囊藻MC-LR产生量的增加,且染毒时间越长,MC-LR产生量越多。但ACT及其对映体会对水华微囊藻细胞壁造成不同程度的破坏,导致MC-LR大量释放至培养基中,因此藻内MC-LR含量减少,藻外MC-LR含量增多。ACT及其对映体对水华微囊藻产生和释放藻毒素的影响大小为:αS-ACT>Rac-ACT>αR-ACT,且具有对映体选择性差异。