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目前应用最为广泛的微生物杀虫剂之一——苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt),由于其田间应用持效期较短,进一步发展受到限制。主要原因之一是Bt易受外界环境因素(如紫外、高温、干旱等)和自身因素(如定殖、毒力等)的影响。生物被膜是细菌适应环境的一种特殊的生长状态,能调控细菌对环境胁迫的适应能力,与细菌的定殖、侵染、毒力等多种特性密切相关。本研究通过筛选并鉴定产生物被膜Bt菌株,旨在探索生物被膜对Bt生物防治效果的影响。本研究对88株Bt菌株进行生物被膜产生菌的筛选,获得了一株高效形成生物被膜的Bt菌株XL6,其分离自内蒙古自治区。Bt XL6菌株释放的伴胞晶体为菱形,存在晶胞粘连现象,只有1条23kb的质粒。Bt XL6菌株可以表达130kDa的原毒素,并且可被胰蛋白酶进一步消化形成60kDa的活性毒素。Bt XL6菌株中含有生物被膜相关基因约74种。此外,Bt XL6菌株在LBP、LB培养基气-液界面能形成清晰的膜状结构。进一步利用mini-Tn10转座子,构建Bt XL6菌株随机插入突变体库,筛选2株生物被膜形成能力显著降低的突变株,找到其插入位点。这2株突变株插入位点均位于ggedf基因上游。GGDEF结构域包含5个保守氨基酸,分别为甘氨酸2个、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸。与野生菌株Bt XL6相比,突变株的群游能力、生长速度下降。此外,通过同源重组验证了ggdef基因对生物被膜形成的影响。因此,ggdef基因调控生物被膜的形成。为了研究生物被膜的定殖,携带gfp基因的pSTK质粒电转化至Bt XL6菌株中。对数期的细胞能够在接触表面,甚至在根表面迅速形成生物被膜。本研究结果将为高效持久的Bt杀虫剂的研制提供研究思路。