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目的:探讨缺血后处理(ischemic postconditioning IP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注(ischemia and reperfusion I/R)神经保护作用的最佳时间窗。方法:实验分组: 80只雄性SD大鼠,体重250~300g,随机分5组(n=16)。假手术组;对照组:单纯缺血再灌注; IP=15s、30s、1min组,反复三次缺血再灌注。上述80只大鼠经再灌注24h后行神经功能障碍评分。而后其中20只(每组随机取4只)大鼠行Morris水迷宫测定,20只(每组随机取4只)大鼠取大脑后染色确定脑梗死容积百分比,其余40只运用组织原位标记凋亡细胞检测海马CA1区细胞凋亡,HE染色观察海马CA1区神经元形态学变化,免疫组化法观察海马CA1区TNF-α、APP(amyloid precursor protein,APP)表达的变化。结果:1、神经功能障碍评分:假手术组大鼠未见神经功能损害,缺血各组动物均表现出一定神经功能障碍。IP=15s、30s、1min组神经功能评分明显优于对照组(P <0.05),其中IP=15s、30s组NDS小于IP=1min组(P <0.05)。2、大鼠水迷宫空间学习记忆能力测定:缺血再灌注组大鼠较假手术组逃避潜伏期明显延长(P < 0.01)。IP=15s、30s、1min组较对照组逃避潜伏期缩短,其中尤以IP=15s和IP=30s组逃避潜伏期最短(P<0.05),各组大鼠游泳速度无明显差别。观察大鼠运动轨迹,大鼠在第一象限(平台所在象限)互动时间占总时间的百分比,对照组和IP=1min组所花时间百分比明显少于其他各组,IP=15s、30s和对照组比较有统计学意义(P<0.05)。3、大鼠脑梗死体积变化:假手术组无肉眼可见的梗死灶形成,缺血再灌注组大鼠均表现不同程度的梗死灶形成。IP组大鼠脑梗死体积显著低于对照组(P<0.05)。IP=1min组脑梗死体积大于IP=15s、30s组(P <0.05)。4、HE染色:假手术组,海马CA1区可见神经元呈层状分布,各层细胞数量较多,形态完整。对照组可见较大梗死灶,神经元结构消失,排列紊乱,细胞数量减少,核固缩,深染胞体缩小。IP=15S,IP=30S组正常结构略有消失,胞核固缩,深染细胞较少。IP=1min组可见梗死灶(小于对照组),神经元存在,排列紊乱,细胞数量减少,部分细胞出现核固缩、深染。5、凋亡细胞的表达:假手术组海马CA1区偶可见极少数凋亡细胞。对照组与假手术组、IP各组相比可见较多的阳性细胞。与对照组相比,IP各组凋亡细胞明显减少(P < 0.05)。其中IP=15s、30s组CA1区凋亡细胞的表达最低(P<0.05)。6、免疫组织化学研究:(1)TNF-α假手术组海马CA1区可见极少数TNF-α阳性细胞散在分布,对照组海马CA1区可见大量TNF-α阳性细胞,TNF-α阳性细胞与假手术组相比有明显统计学差异(P<0.01),IP=15s、30 s,1min组与对照组比较,可见海马CA1区TNF-α阳性细胞明显减少(P<0.05)。IP=15s、30s组TNF-α阳性细胞表达低于IP=1min组(P<0.05)。(2)APP假手术组偶有表达,对照组较假手术组、IP各组海马CA1区APP表达增加。IP=15s、30s组APP平均光密度值明显低于IP=1min组(P<0.05),对大鼠局灶性脑缺血损伤保护作用的最佳时间窗为15s、30s缺血再灌注。结论:IP可明显改善大鼠缺血再灌注后神经功能的减退,缩小脑梗死体积,减少海马CA1区TNF-α、APP及细胞凋亡的表达。大鼠局灶性脑缺血损伤保护作用的最佳时间窗为15s、30s缺血再灌注。