慢性阻塞性肺疾病脂氧素A4代谢关键酶及其受体表达的研究

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目的:  慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是常见的慢性肺部炎症性疾病,有着较高的发病率。慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease, AECOPD)常合并炎症并发症,患者肺功能恶化,是COPD的首要死亡原因。本研究旨在探讨COPD及AECOPD患者脂氧素A4体内合成的关键酶5-LO、15-LO以及其灭活关键酶15-PDGR、LTB4DH的表达情况与脂氧素A4受体ALX、白三烯B4受体BLT1的表达水平,通过从蛋白及基因水平检测其相关酶及受体的表达,从炎症消退的角度,来探究COPD的发病机制,从而寻找治疗COPD的新靶点,为临床提供有效的治疗新策略。  方法:  参照中华医学会呼吸病学分会2013年修订的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》,并结合患者的病情、症状及影像学检查,将符合诊断COPD及AECOPD的患者纳入研究当中,并且选取健康体检者为对照,分为健康对照组、COPD组、AECOPD组三个试验组,外周静脉采血,提取外周血的RNA,利用荧光定量PCR技术检测各组外周血中5-LO mRNA、15-LO-1 mRNA、15-PGDH mRNA、LTB4DH mRNA、ALX mRNA、BLT1mRNA的表达水平,同时利用流式细胞技术检测各组外周血中性粒细胞、单核细胞及淋巴细胞的ALX受体、BLT1受体的表达水平。  结果:  1.荧光定量PCR技术检测各组外周血中5 LO mRNA、15 LO-1 mRNA、15-PGDH mRNA、LTB4DH mRNA的表达情况:  5-LO在AECOPD组中表达较高,与COPD组相比,具有统计学差异(P<0.01)。其余各组间并没有统计学差异,其中COPD组的表达量较低。各试验组之间,15-LO-1在表达量上并没有明显的统计学差异,COPD组的表达量较低。15-PGDH与LTB4DH的表达各组内差异较大,各组间无明显差异。  2.流式细胞术检测各试验组外周血白细胞的ALX受体表达情况:  在健康对照组、COPD组及AECOPD组中,外周血单核细胞的ALX受体表达较高。比较单核细胞上ALX受体表达各组间的差异,与健康对照组相比,AECOPD组的表达水平较高,有统计学意义(P<0.01)。与COPD组相比,AECOPD组的表达水平也是较高的,有统计学意义(P<0.05)。在三组当中,COPD组单核细胞的ALX受体表达处于较低的水平,但与健康对照组相比,差异无统计学意义。  ALX受体在中性粒细胞上的表达各组间没有明显差异,其在淋巴细胞上表达量很小,与健康对照组相比,AECOPD组ALX受体在淋巴细胞上的表达较高,差异有统计学意义(P<0.01)。  3.流式细胞术检测各试验组外周血白细胞的BLT1受体表达情况:  与健康对照组及COPD组相比,AECOPD组BLT1受体在单核细胞上的表达水平较高,有统计学意义(P<0.05)。其余各组间比较,无统计学意义。BLT1受体在中性粒细胞上的表达各组间无明显差异,其在淋巴细胞上几乎不表达。  4.荧光定量PCR检测各试验组外周血中ALX mRNA、BLT1 mRNA表达情况:  AECOPD组外周血ALX mRNA表达水平较COPD组明显增高,并且其差异具有统计学意义(P<0.05),其余各组间无明显差异,COPD组的ALX mRNA处于较低的水平。各试验组外周血样本BLT1 mRNA的表达水平没有统计学差异,其中AECOPD组的BLT1表达水平较高。  结论:  COPD组患者脂氧素A4相关的合成酶5-LO表达较低,且ALX受体表达较低,可能提示COPD患者存在炎症消退障碍,从而导致COPD的炎症转为慢性,持续存在。而AECOPD患者炎症程度较强,脂氧素A4相关的合成酶5-LO及ALX受体表达均较高,是慢性炎症的急性表现,可能与触发促炎症消退程序有关。
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