水曲柳离体根培养体系的建立

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pengpenghu
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本项研究首次对适合水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)实生苗根尖的消毒和无菌苗根尖离体培养的各种条件进行筛选。 在水曲柳实生苗根尖的初代培养中,选用15种不同的消毒剂对水曲柳实生苗根尖进行消毒处理。结果表明:采用4%NaClO消毒4min然后再用0.1%HgCl2消毒10min的二次消毒法,对水曲柳根尖表面消毒效果最好,污染率降低到30.47%。根尖经消毒后,在无污染的培养基中添加0~100mg/L浓度范围内的不同种类的抗生素,认为可采用60~80mg/L的庆大霉素、四环素、氯霉素中的任意一种抗生素,污染率都有所降低。在已污染的培养基中添加同样的抗生素,没有起到任何的抑菌效果。 以水曲柳成熟种胚为外植体进行离体培养试验,以获得无菌苗的胚根。通过对培养基、蔗糖浓度、激素浓度等各种条件的筛选,结果表明:种胚在附加2%蔗糖和0.3mg/L NAA的1/2MS培养基中胚根长势最好。 以水曲柳无菌苗根尖为外植体,研究了不同的培养基、培养方式、琼脂浓度、糖的种类和浓度、激素浓度等对离体培养的水曲柳根尖生长的影响,结果表明:1/2MS、MS、White、B5、WPM、DKW这六种培养基,White培养基对于根尖的生长和诱导是最好的;暗培养明显有利于根尖的生长;不添加琼脂的液体培养基对根尖的生长较添加琼脂的固体培养基和固-液培养基好;蔗糖作为碳源的效果较果糖和麦芽糖好,其中以3%的蔗糖对离体根尖的生长效果最好;最佳的激素组合和浓度为0.5mg/L BA+1.0mg/L NAA。 以水曲柳无菌苗根尖为外植体诱导愈伤组织的实验中,1/2MS、MS、White、B5、WPM、DKW这六种培养基,1/2MS培养基对根尖具有最高的愈伤组织诱导率;NAA相对IBA和2,4-D来说,诱导愈伤组织的效果是最好的,在0.5mg/L NAA+1.0mg/L BA培养基中,愈伤组织的最高诱导率达到了40.3%。增殖培养基为附加20g/L蔗糖,7g/L琼脂,2.0mg/L NAA+1mg/L BA的MS培养基。
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